农业生物技术学报

作者：高风英, 董浚键, 张赫桐, 李佳鑫, 朱芷琳, 孙成飞, 叶星

单位：1 中国水产科学研究院 珠江水产研究所/农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室,广州 510380; 2 天津农学院 水产学院,天津 300384

关键词：大口黑鲈,线粒体抗病毒信号蛋白,表达分析,亚细胞定位,核因子κB (NF-κB),β型干扰素(IFN-β),

基金：中国水产科学研究院基本科研业务费(2023TD95); 现代农业产业技术体系专项资金(CARS-46)

线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein, MAVS)是通过RIG-1样受体途径的先天抗病毒反应的关键分子,在哺乳动物和鱼类先天免疫中发挥重要作用。为研究MAVS基因在大口黑鲈(Micropterus salmoides)先天免疫中的作用,本研究利用反转录PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)和克隆获得了大口黑鲈 MAVS基因(GenBank No. PP740757)的全长cDNA,并对其进行生物信息学分析;利用qPCR方法分析了MAVS基因在健康大口黑鲈各组织的表达情况及诺卡氏菌(Nocardia seriolae)和聚肌胞苷酸 (polyinosinic polycytidylic acid, Poly I:C) 刺激后不同组织在不同时间点的表达量变化。利用免疫荧光法对MAVS基因进行了亚细胞定位,并利用双荧光素酶活性分析法MAVS基因对核因子κB (nuclear factor kappa-B, NF-κB)和β型干扰素(β- type interferon, IFN-β)启动子活性的影响。结果表明,MAVS cDNA长度为1 921 bp,编码586个氨基酸残基的肽。大口黑鲈MAVS的推测蛋白具有N末端半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶招募域(caspase recruiting domains, CARD)结构域和富脯氨酸区域,已知这些结构域是哺乳动物MAVS的重要功能结构域。大口黑鲈MAVS蛋白与其他鱼类具有较高的同源性(48.7%~96.1%,与草鱼(Ctenopharyngodon idella)的同源性为29.6%)。系统发育分析显示,大口黑鲈MAVS与其他鱼类MAVS聚为一支。MAVS mRNA在健康大口黑鲈的所有被检测组织中均有表达,在鳃中的相对表达量最高。在所有4种检测的组织中,两种免疫刺激剂均上调了大口黑鲈MAVS转录水平。其中,Poly I:C刺激后9 d,MAVS在鳃中的表达量高达对照组的53.17倍(P<0.05)。诺卡氏菌感染后,在肾组织中,MAVS的相对表达量在感染后6 d出现了最大上调,感染组的相对表达量为对照组的14.88倍(P<0.05)。亚细胞定位显示,MAVS在HeLa细胞的细胞质中表达。大口黑鲈MAVS的过表达可以增强NF-κB和 IFN-β启动子活性。研究结果表明,MAVS在大口黑鲈先天免疫信号通路中发挥重要作用。本研究为进一步阐明MAVS基因在大口黑鲈先天免疫中的作用奠定基础。

来源：2026年第1期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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