农业生物技术学报

作者：孙楠桢, 张蕾, 陈若楠, 张若彤, 孙杰

单位：石河子大学 动物科技学院,石河子 832000

关键词：鸡前脂肪细胞,miR-1306-5p,骨形态发生蛋白2 (BMP2),细胞增殖,细胞分化,

基金：国家自然科学基金(31660654)

miR-1306-5p对肿瘤细胞的增殖具有促进作用,对脂肪细胞增殖与分化的影响尚不明确。课题组前期采集玫瑰冠鸡(Gallus gallus)和科宝鸡胚胎期第8天胸肌组织进行高通量测序,本研究选择测序数据中筛选出的差异表达的miR-1306-5p,旨在探究miR-1306-5p在鸡前脂肪细胞增殖与分化过程中的功能。利用Targetscan和miRanda软件预测miR-1306-5p的靶基因,以脂肪代谢相关基因—骨形态发生蛋白2 (bone morphogenetic protein 2, BMP2)为靶基因构建野生型和突变型载体,与miR-1306-5p模拟物共转染鸡成纤维细胞,利用荧光素酶报告基因检测系统验证二者的靶标关系。以miR-1306-5p模拟物和抑制物分别转染鸡前脂肪细胞,利用CCK-8 (Cell Counting Kit-8)试剂盒检测细胞增殖能力,通过油红O染色检测油酸诱导的分化情况。结果显示,BMP2野生型与miR-1306-5p模拟物共转染组的荧光素酶活性较阴性对照极显著下降(P<0.01),而突变型没有显著变化;miR-1306-5p模拟物转染鸡前脂肪细胞48、72和96 h,细胞增殖能力极显著低于阴性对照(P<0.01);在鸡前脂肪细胞的油酸诱导分化过程中,脂肪酸结合蛋白 4 (fatty acid binding protein 4, FABP4)基因表达量极显著升高(P<0.01),而内源性miR-1306-5p和BMP2在诱导分化48和72 h的基因表达量极显著降低(P<0.01);在鸡前脂肪细胞中转染miR-1306-5p模拟物后脂滴较对照小,转染miR-1306-5p抑制物后脂滴增多。因此,miR-1306-5p可能通过靶向BMP2而抑制鸡前脂肪细胞的分化。本研究为深入探讨miR-1306-5p在鸡前脂肪细胞分化中的作用机制提供基础资料。

来源：2025年第1期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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