农业生物技术学报

作者：熊畑畑, 吴钰, 邵钺馨, 陈冲, 王琬婷, 程菲, 李聪

单位：西北农林科技大学 动物科技学院/陕西省动物遗传育种与繁殖重点实验室, 杨凌 712100

关键词：酰基辅酶A合成酶长链家族成员6 (ACSL6),启动子克隆,片段缺失分析,生物信息学分析,转录因子,

基金：国家重点研发计划(2022YFD1300203); 陕西省畜禽育种“两链”融合重点专项(2022GD-TSLD-46-0203)

酰基辅酶A合成酶长链家族成员6 (acyl-CoA synthetase long chain family member 6, ACSL6)作为摄取、转运游离脂肪酸的关键酶,参与调控奶畜泌乳中脂肪酸的代谢过程。本研究旨在通过对奶山羊(Capra hircus) ACSL6基因(Gene ID: XM_018050725.1)启动子克隆、生物信息学分析和双荧光素酶活性检测,初步探究ACSL6基因的转录调控机制。以西农萨能奶山羊血液基因组DNA为模板,经PCR扩增获得ACSL6启动子的全长序列;利用生物信息学软件筛选预测分值较高的结合位点和启动子特征序列;克隆并构建启动子缺失片段载体,与内参载体共同转染奶山羊乳腺上皮细胞,通过双荧光素酶活性检测确定启动子活性区域。结果表明,克隆获得ACSL6基因启动子全长序列2 108 bp;ACSL6启动子上存在多种转录因子的结合位点;在启动子序列-907~-807 bp和-513~-54 bp存在2个长度分别为101和460 bp的CpG岛;对克隆获得的9个缺失片段进行双荧光素酶活性分析,发现ACSL6基因启动子的核心区域定位于-170~-33 bp,在转录起始位点上游-2 004~-1 707 bp、-1 334~-957 bp和-584 ~-271 bp可能存在负调控元件。本研究为揭示ACSL6调控奶山羊乳脂代谢的分子机理提供基础资料,为从分子层面改善羊乳品质提供参考。

来源：2025年第1期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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