农业生物技术学报

作者：贾利毅, 潘阳阳, 王萌, 张晖, 李玉平, 徐子疆, 王军乾, 余四九, 王立斌

单位：1甘肃农业大学 动物医学院,兰州 730070;2甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心,兰州 730070

关键词：牦牛,高迁移率族核小体结合域蛋白2 (HMGN2),原核表达,多克隆抗体,

基金：国家自然科学基金(32273091); 甘肃省自然科学基金(22JR5RA864)

高迁移率族核小体结合域蛋白2 (high mobility group nucleosomal binding domain 2, HMGN2)在哺乳动物胚胎发育过程中高度表达,可与核小体结合,改变染色体结构,参与调节细胞分化、胚胎发育等过程,为探究HMGN2蛋白在牦牛(Bos grunniens)子宫中的作用机理,本研究以牦牛为研究对象,克隆牦牛HMGN2基因并制备牦牛HMGN2多克隆抗体,通过qPCR检测HMGN2基因在牦牛不同时期子宫中的相对表达量;利用纯化的牦牛HMGN2重组蛋白免疫新西兰大白兔(Oryctolagus cuniculus),通过A/G-Sepharose柱层析法纯化制备牦牛HMGN2多克隆抗体;利用Western blot检测HMGN2蛋白的表达,并通过免疫组织化学法(immunohistochemistry, IHC)检测HMGN2蛋白的定位。结果表明,本研究成功克隆牦牛HMGN2基因(GenBank No. OR713742)并构建重组质粒pKMD-SUMO-HMGN2,诱导产生重组蛋白,符合预期结果。qPCR和Western blot的结果显示,HMGN2基因及蛋白在牦牛妊娠早期子宫中的表达量最高。IHC检测结果表明,HMGN2主要表达于子宫腺与子宫内膜。提示HMGN2可能在牦牛妊娠早期对胚胎的附植和胎儿的生长发育具有重要调节作用。以上结果表明,本研究所制备的牦牛HMGN2抗体可为进一步研究HMGN2蛋白的作用 机理提供基础资料。

来源：2025年第2期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

查看农业生物技术学报杂志2025年第2期