农业生物技术学报

作者：张松雨, 曾馨仪, 朱源涛, 李志远, 苏俊, 李秋艳

单位：中国农业大学 生物学院/畜禽生物育种全国重点实验室/生命科学国家级实验教学示范中心,北京 100193

关键词：杂交瘤细胞,谷氨酰胺,抗菌肽,人表皮生长因子(hEGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),维生素C,

基金：国家现代农业产业技术体系(CARS-36)

杂交瘤细胞培养是单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)生产的重要方法之一。本课题组前期制备出猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的杂交瘤细胞单克隆抗体,本研究对杂交瘤细胞培养体系进行优化,在杂交瘤细胞培养体系中加入不同浓度的添加因子,包括谷氨酰胺(0~10 mmol/L)、抗菌肽(0~20 μg/mL)、人表皮生长因子(human epidermal growth factor, hEGF)(0~20 ng/mL)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)(0~20 ng/mL)和维生素C (vitamin C, VitC)(0~20 ng/mL),采用生长曲线绘制和ELISA方法探究添加因子对杂交瘤细胞生长和抗体分泌的影响。结果显示,谷氨酰胺和抗菌肽添加在第5天达到细胞密度的峰值,其中细胞密度最大的添加浓度为6 mmol/L谷氨酰胺和10 μg/mL抗菌肽;hEGF、bFGF和VitC添加在第4天达到细胞密度的峰值,其中细胞密度最大的添加浓度为10 ng/mL hEGF、20 ng/mL bFGF和20 ng/mL VitC。抗体效价检测结果显示,谷氨酰胺添加组在6 mmol/L浓度获得最高的抗体效价(1∶8000),抗菌肽添加组在10 μg/mL浓度获得最高的抗体效价(1∶16000),hEGF和bFGF添加组在5和10 ng/mL浓度均具有最高的抗体效价(1∶16000),VitC在10 ng/mL浓度获得最高的抗体效价(1∶8000)。本研究通过改变培养基成分提高杂交瘤细胞增殖能力和抗体分泌能力,为研发生产用杂交瘤细胞培养基提供技术支持。

来源：2025年第2期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

查看农业生物技术学报杂志2025年第2期