农业生物技术学报

作者：高风英, 董浚键, 张赫桐, 李佳鑫, 朱芷琳, 孙成飞, 叶星

单位：1 中国水产科学研究院 珠江水产研究所/农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室,广州 510380;2 天津农学院 水产学院,天津 300384

关键词：大口黑鲈,髓细胞分化因子88 (MyD88),克隆,表达分析,亚细胞定位,核因子κB (NF-κB),

基金：中国水产科学研究院基本科研业务费(2023TD95); 现代农业产业技术体系专项资金(CARS-46)

接头蛋白髓细胞分化因子88 (myeloid differentiation factor 88, MyD88)通常参与白介素-1受体(interleukin-1 receptor, IL-1R)和Toll样受体(Toll-like receptor, TLR)介导的核因子κB (nuclear factor kappa-B, NF-κB)激活,在先天免疫中发挥重要作用。在本研究中,克隆了大口黑鲈(Micropterus salmoides) MyD88的全长cDNA,包含一个867 bp的ORF,编码288个氨基酸残基的肽。大口黑鲈MyD88的推测蛋白具有N末端死亡结构域和C末端TIR (Toll-like/IL-1)结构域,已知这些结构域是哺乳动物MyD88的重要功能结构域。大口黑鲈MyD88蛋白与其他脊椎动物具有较高的同源性(58.5%~99.3%)。系统发育分析显示,大口黑鲈MyD88与其他鱼类MyD88聚为一支。MyD88 mRNA在健康大口黑鲈的所有被检测组织中均有表达,在肝脏中表达量最高。为了探索大口黑鲈MyD88的先天免疫作用,研究了其在肠、鳃、脾、肾中,对聚胞肌酸(polyinosinic-polycytidylic acid, PolyI:C)和诺卡氏菌(Nocardia seriolae)刺激的基因表达谱。结果显示,在所有4种检测的组织中,2种免疫刺激剂均上调了大口黑鲈MyD88转录水平,其中受诺卡氏菌的诱导最强。肾组织中,MyD88在感染后9 d出现了最大上调,感染组表达量为对照组的8.5倍(P<0.05);在鳃组织中PolyI:C诱导启动最早,刺激后8 h,在鳃组织中实验组相对表达量为对照组的5.6倍。大口黑鲈MyD88分布于HeLa细胞质中。大口黑鲈MyD88的过表达可以激活NF-κB。这些结果为阐明MyD88在大口鲈鱼先天免疫中的作用提供了基础数据。

来源：2025年第2期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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