农业生物技术学报

作者：周博, 魏志恒, 刘世昊, 刘书鸣, 夏磊, 徐璐, 郁建锋, 顾志良

单位：常熟理工学院 生物与食品工程学院,常熟 215500

关键词：鸡,过氧化物酶体增殖物激活受体λ共激活因子-1α (PGC-1α)基因,真核表达,鸡肝癌细胞系(LMH)细胞,脂代谢,脂肪沉积,

基金：江苏省自然科学基金(BK20191476); 常熟理工学院2023大学生创业创新计划资助

过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α (peroxisome proliferator activated receptor γ coactivator-1 alpha, PGC-1α)是一种转录共激活因子,参与调控体内各类能量代谢过程,对脂肪沉积起着关键作用。为探讨PGC-1α基因在鸡(Gallus gallus)脂质代谢中的作用和机制,本研究检测了PGC-1α基因在鸡12种组织中的表达情况,通过RT-PCR的方法,扩增并获得鸡PGC-1α基因CDS片段,构建真核表达载体,Western blot检测表达载体转染鸡肝癌细胞系(leghorn male hepatoma, LMH)后能否表达PGC-1α蛋白;过表达和敲低LMH细胞中PGC-1α基因后,油红O染色检测脂滴沉积变化,比色法测定总甘油三酯(total triglyceride, TG)含量的变化,qPCR检测对脂质代谢相关基因表达的影响。结果显示,PGC-1α基因在心脏组织中表达量最高,在腿肌、肾和脑组织中表达量较高;Western blot检测发现构建的过表达载体转染LMH细胞能成功表达融合蛋白;LMH细胞中过表达PGC-1α基因会使脂质沉积和TG含量极显著下降(P<0.01),而PGC-1α基因敲低后脂质沉积有增加趋势,且TG含量显著增加(P<0.05)。LMH细胞中PGC-1α基因过表达使得脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase, FASN)基因和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)基因的表达极显著下调(P<0.01),乙酰辅酶A羧化酶α(acetyl-CoA carboxylase alpha, ACACA)基因的表达显著下调(P<0.05),磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1 (phosphoenolpyruvate carboxykinase 1, PCK1)基因表达极显著上调(P<0.01);PGC-1α基因敲低使PCK1基因表达极显著下降(P<0.01)。上述结果表明,鸡PGC-1α基因可能是通过调节上述功能基因表达而发挥作用。本研究通过构建PGC-1α基因的过表达和敲低模型,揭示了该基因在鸡脂质代谢中的关键调控作用,尤其是通过调节FASN、PPARγ、ACACA和PCK1等基因的表达,影响脂质沉积和甘油三酯含量,表明PGC-1α基因可能在调控鸡体内脂肪代谢中扮演重要角色。本研究为深入理解PGC-1α在鸡脂质代谢中的功能机制提供了参考依据。

来源：2025年第2期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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