农业生物技术学报

作者：赵翔, 郭志菁, 罗方, 魏志恒, 董小敏, 徐璐, 郁建锋, 顾志良

单位：常熟理工学院 生物与食品工程学院,常熟 215500

关键词：过氧化物酶体增殖剂受体α, (PPARα),重组蛋白,可溶性表达,抗体,效价,

基金：常熟理工学院大学生创新创业训练计划项目(XJDC2023234)

过氧化物酶体增殖剂受体α (peroxisome proliferator activated receptor α, PPARα)作为一个重要的转录调控因子,参与动物脂肪酸氧化、脂蛋白组装和转运、脂质在肝脏中分解代谢等脂类代谢过程,从蛋白质水平上研究PPARα在鸡(Gallus gallus)的脂质代谢中的作用具有重要意义。为了获得PPARα的有效抗体,本研究以大肠杆菌(Escherichia coli)表达鸡PPARα重组蛋白免疫Sprague-Dawley (SD)大鼠(Rattus norvegicus)制备其抗血清,通过Western blot及ELISA检测抗体的效价。结果显示,PPARα重组蛋白在15 ℃和0.06 mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导条件下可在大肠杆菌中实现可溶性表达,Ni2+亲和层析获得重组蛋白的纯度约为89%,ELISA检测结果表明,所制备的PPARα抗体的效价约为1:512 000,抗体的Western blot检出灵敏度约为100~200 pg,并能有效地检出鸡肝脏的内源性PPARα。本研究为进一步解析鸡PPARα转录因子对脂质代谢等相关基因的调控功能提供了可靠抗体。

来源：2025年第3期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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