农业生物技术学报

作者：王丽花, 杨秀梅, 何晓琴, 张艺萍, 段青, 杨舒淇, 苏艳

单位：1 云南省农业科学院 花卉研究所/云南省花卉育种重点实验室/国家观赏园艺工程技术研究中心,昆明 650205; 2 昆明市盘龙区人民政府青云街道办事处,昆明 650051

关键词：百合,双重RT-PCR,车前草花叶病毒(PlAMV),百合斑驳病毒(LMoV),

基金：云南省创新引导与科技型企业培育计划(202204BI090022); 云南省种子种业联合实验室项目(202205AR070001); 国家花卉产业体系昆明综合试验站项目(CARS-23-G56)

车前草花叶病毒(Plantago asiatica mosaic virus, PlAMV)和百合斑驳病毒(Lily mottle virus, LMoV)是目前对我国百合(Lilium spp.)产业危害最严重的2种病毒。为建立上述2种病毒的快速高效检测体系,本研究首先提取百合感病植株总RNA,经逆转录获得cDNA,后以cDNA为模板开展双重同步检测体系优化,并对其特异性和灵敏度等进行检测。结果表明,建立的双重同步检测体系对PlAMV和LMoV的特异性扩增片段大小分别为910和521 bp,对其他常见病毒均无扩增,表明所建立方法特异性强;PlAMV和LMoV的最低检出限分别为967.5 fg和59.0 pg,相比于单基因RT-PCR检测的最低检出限(PlAMV 19.35 fg, LMoV 11.8 pg),灵敏度分别降低了50倍和5倍;扩增产物测序片段与不同来源的19个PlAMV分离物和21个LMoV分离物开展BLAST序列分析显示,PlAMV的相似性为86.71%~99.40%,LMoV的相似性为94.75%~99.49%。利用双重同步检测体系对19个田间样品进行检测应用,结果显示,19个样品中有3个样品同时携带PlAMV和LMoV,2个样品携带PlAMV,4个样品携带LMoV,其余10个样品未检出,该结果与基因芯片法检测结果一致。综上所述,本研究所建立的检测体系可同时高效检测PlAMV和LMoV2种病毒,结果可靠,应用前景广阔。

来源：2025年第3期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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