农业生物技术学报

作者：孟方, 方俊超, 田海峰, 邵蓬, 胡乔木

单位：1 天津农学院 水产学院, 天津 300380; 2 中国水产科学研究院 长江水产研究所, 武汉 430223

关键词：丝氨酸和精氨酸富集的剪接因子3 (srsf3)基因,中国大鲵,性逆转,表达分析,荧光原位杂交,

基金：国家自然科学基金(32373131)

大鲵(Andrias davidianus)雌雄生长差异大,在性别分化过程中丝氨酸和精氨酸富集的剪接因子3(serine/arginine-rich splicing factor 3, srsf3)基因被证实参与大鲵性别分化相关基因—核受体亚家族5 组A成员2 (nuclear receptor subfamily 5 group A member 2, Nr5a2)选择性剪接。为探究srsf3基因在中国大鲵性别分化中的作用机制,本研究采用qPCR技术分析大鲵不同组织,不同发育时期性腺与性激素诱导后性腺中srsf3表达量的变化;通过荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization, FISH)确定srsf3基因在大鲵精巢与卵巢中的表达定位。通过前期对大鲵性腺转录组测序结果分析,srsf3基因全长为1 478 bp,开放阅读框为504 bp,编码167个氨基酸。系统进化分析表明,大鲵SRSF3氨基酸序列与两栖纲热带爪蟾(Xenopus tropicalis)亲缘关系密切。qPCR结果表明,srsf3基因在大鲵卵巢中表达水平最高,垂体组织中次之,肌肉与心脏组织中表达稍低;在肝脏、脾脏、肺、胃组织中低表达。srsf3基因在大鲵性腺各时期中的表达显示,2~5年龄卵巢均显著高于精巢(P<0.05);2龄时期卵巢中表达量达最高,随后srsf3基因表达量在卵巢中呈逐年下降趋势,于4~6龄卵巢中表达量趋于稳定态势。srsf3基因表达量在性逆转雄性中最高,其次为性逆转雌性;在性逆转雌鱼卵巢中显著性高于普通雌鱼卵巢(P<0.05),性逆转雄鱼精巢中表达量显著高于普通雄鱼精巢(P<0.05)。FISH结果显示,srsf3基因在大鲵卵巢、精巢中均有表达。以上研究表明,srsf3基因参与大鲵性腺发育过程,且在大鲵性逆转过程中发挥重要作用。本研究对srsf3基因的功能解析有助于加深对两栖类性别分化机制的理解。

来源：2025年第4期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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