农业生物技术学报

作者：王聪亮, 陈文博, 万仕成, 李剑南, 任赵飞, 韩斌, 李娜, 雷安民, 杜晓敏, 屈雷, 朱海鲸, 华进联

单位：1 西北农林科技大学 动物医学院 陕西省干细胞工程技术研究中心, 杨凌 712000; 2 榆林学院 陕西省绒山羊工程技术研究中心, 榆林 719000; 3 榆林市畜牧兽医服务中心, 榆林 719000

关键词：山羊,天然抗性相关性巨噬细胞蛋白1 (NRAMP1),过表达,慢病毒,显微注射,布鲁氏菌病,

基金：国家自然科学基金(32072806;32372970);国家重点研发计划(2022YFD1302201);陕西省畜牧科技示范和畜牧专项(20221086;20230978);陕西省教育厅重大项目(22JY075);陕西省农业攻关核心技术(2024NYGG005-6)

天然抗性相关性巨噬细胞蛋白1 (natural resistance-associated macrophage protein 1, NRAMP1)与结核病、布鲁氏菌病等多种胞内菌感染抗性相关。本研究旨在制备NRAMP1基因过表达山羊(Capra hircus),并对基因过表达山羊的血液生理生化和生长发育指标进行比较分析,为抗布鲁氏菌病模型建立和转基因动物遗传育种提供研究模型与平台。基于本实验室前期构建的山羊NRAMP1基因慢病毒表达载体,利用山羊超数排卵和原核胚胎显微注射技术进行NRAMP1基因过表达山羊的生产,监测评估NRAMP1基因过表达对山羊血液生理生化变化和生长发育的影响。结果显示,成年陕北白绒山羊以210 IU 促卵泡激素(follicle-stimulating hormone, FSH)剂量进行超数排卵的原核胚胎回收率显著高于270 IU(P<0.05);原核胚胎显微注射后移植共获得15只山羊,经PCR鉴定,3只为阳性基因过表达山羊;qRT-PCR和Western blot鉴定结果表明,NRAMP1在基因过表达山羊睾丸组织中的mRNA和蛋白表达水平显著增加(P<0.05);血液生理与生化测定结果表明,NRAMP1基因过表达山羊与野生型山羊的各项血液生理与生化指标差异不显著(P>0.05);生长性能测定结果表明,NRAMP1基因过表达山羊与野生型山羊初生重、1~6月龄体重和3~6月龄体高、体长等生长性状差异不显著(P>0.05)。本研究成功构建NRAMP1基因过表达山羊模型,且NRAMP1基因过表达不影响山羊自身健康。本研究为培育抗布鲁氏菌病山羊及其抗病机制研究提供了科学依据。

来源：2025年第4期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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