农业生物技术学报

作者：王劭, 刘鸿威, 程晓霞, 朱小丽, 江丹丹, 肖世峰, 陈少莺, 陈仕龙

单位：1 福建省农业科学院 畜牧兽医研究所,福州 350013;2 福建农林大学 动物科学学院,福州 350002

关键词：番鸭小鹅瘟病毒(MDGPV),番鸭细小病毒(MDPV),双重PCR,

基金：福建省农业高质量发展超越“5511”协同创新工程项目(XTCXGC2021018); 福建省农业科学院对外合作项目(DWHZ2024-05); 福建省农业科学院科技创新团队建设项目(CXTD2021034); 福建省属公益类科研院所基本科研专项(2022R1026004; 2022R1026006; 2023R1024003); 国家自然科学基金(32302868); 中央引导地方科技发展专项(2022L3019)

番鸭小鹅瘟病毒(Muscovy duck-origin goose parvovirus, MDGPV)是经典鹅细小病毒(Classical Goose parvovirus, cGPV)和番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus, MDPV)基因重组产生的新型水禽细小病毒,是引起雏番鸭(Cairina moschata)严重下痢和渗出性肠炎的主要病原之一,导致雏番鸭免疫力下降,患病率和死亡率升高。本研究旨在建立一种能够同时鉴别检测MDGPV和MDPV的三引物双重PCR方法,并对2种病毒当前的流行情况进行鉴别与监测。根据GenBank中已发布的MDGPV和MDPV衣壳蛋白1 (viral capsid protein 1, VP1)基因的重组特征,应用Oligo 7.0软件设计并合成了3条鉴别引物,两两组合形成2套PCR反应体系进行扩增,目的片段大小分别为493 bp (MDGPV)和827 bp (MDPV),分别构建MDGPV和MDPV阳性重组质粒作为标准品,进行双重PCR扩增。结果表明,本研究成功建立了一种可以同时检测MDGPV和MDPV的双重PCR鉴别方法。该三引物双重PCR方法可重复性好,特异性与敏感性高,对MDGPV和MDPV的最低检出测限分别为99.6和96.1 copies/μL总DNA。对102份疑似水禽细小病毒感染发病的临床样品进行检测,MDGPV阳性检出率为31.37% (32/102),MDPV阳性检出率为7.84% (8/102),混合感染阳性检出率为1.96% (2/102),与GPV、MDPV通用SYBR Green Ⅰ PCR检测方法及病毒分离鉴定结果一致。综上所述,本研究所建立的MDGPV和MDPV双重PCR诊断方法特异性高,敏感性好,丰富了水禽细小病毒病的检测手段,有助于MDGPV和MDPV的临床诊断及流行病学监测。

来源：2025年第5期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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