农业生物技术学报

北大核心,CA,JST,CSCD,

国内刊号:11-3342/S

国际刊号:1674-7968

农业生物技术学报杂志2025年第6期:羊源弗氏柠檬酸杆菌微量凝集试验抗体检测方法的建立

发布日期:

作者:李静, 刘艺婷, 杨金钱, 丁略烜, 薛云, 丁轲, 司丽芳, 赵战勤

单位:1 河南科技大学 动物科技学院/洛阳市动物细菌性传染病防控技术重点实验室, 洛阳 471003; 2 河南科技大学 动物科技学院/河南省高等 学校环境与畜产品安全重点学科开放实验室, 洛阳 471003

关键词:羊,弗氏柠檬酸杆菌,微量凝集试验,抗体,

基金:国家自然科学基金(32072899;U1704117)

羊弗氏柠檬酸杆菌病是羊(Ovisaries)的一种新发传染病,为建立该病的快速诊断方法,本研究以羊源致病性弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacterfreundii)LK-1株的灭活菌体为抗原,通过各反应条件的优化建立了微量凝集试验(micro-agglutinationtest,MAT)抗体检测方法。结果显示,凝集抗原的最佳反应浓度为2.0×109cfu/mL,最佳反应温度和时间分别为37℃、7~9h。该方法能够特异性检测羊源弗氏柠檬酸杆菌,对8种常见羊疫病菌阳性血清的检测结果均为阴性(效价≤1∶2)。敏感性试验和疫苗免疫抗体检测结果显示,该方法能检测到弗氏柠檬杆菌灭活疫苗免疫羊后14d的血清抗体(效价≥1∶4),首免后21d和二免后14d(首免后35d)的血清抗体效价分别达到1∶16和1∶64以上。批内变异系数均为0、批间变异系数为5.43%~6.60%,表明重复性良好。利用该方法检测374份临床血清样品,并与ELISA方法对比,结果显示,2种检测方法的总阳性率分别为9.9%和10.7%,检测结果的一致性良好(Kappa值为0.897),初步表明在河南省部分区域的羊群中存在弗氏柠檬酸杆菌感染。本研究为羊弗氏柠檬酸杆菌病的疫苗抗体评价和流行病学调查提供参考。

来源:2025年第6期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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