国内刊号:11-3342/S
国际刊号:1674-7968
发布日期:
作者:陆情梅, 潘智仁, 温晓艳, 刘彬, 张习录, 陈怡, 肖洋, 赵佳福
单位:贵州大学 高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室/动物科学学院, 贵州 550025
关键词:鞣花酸(EA),卵巢颗粒细胞,LPS,炎症损伤,
基金:贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2022]一般089);贵州省“生物育种先导性研究”项目(黔科合支撑[2022]重点
卵巢颗粒细胞(ovariangranulosacells,OGCs)的增殖、凋亡和类固醇激素的合成在卵泡的发育过程中发挥重要作用,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的炎症反应和氧化应激被认为是影响卵巢功能的重要因素,鞣花酸(ellagicacid,EA)作为一种天然多酚类化合物,具有抗氧化、抗癌、抗炎、抗病毒等多种生物活性。本研究分离培养健康且性成熟的贵州黑山羊(Caprahircus)卵巢组织的OGCs。通过CCK-8试验检测EA和LPS对OGCs存活率的影响,通过qRT-PCR检测炎症因子和类固醇激素合成相关基因的相对表达量,通过酶联免疫法(ELISA)检测细胞上清液中雌二醇(estradiol,E2)和孕酮(progesterone,P4)的含量及相关抗氧化指标以评估OGCs功能性变化。结果表明,EA的浓度为1μmol/L时,对OGCs的存活率作用最佳,且LPS处理24h后,对OGCs的半抑制浓度(halfmaximalinhibitoryconcentration),IC50)值为200μg/mL。。qRT-PCR结果表明,与对照组相比,LPS组炎症因子白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNF-α)的相对表达量极显著升高(P<0.01);细胞色素P450家族11亚家族成员A1(cytochromep450family11subfamilymemberA1,CYP11A1)、CYP19A1、3β-羟类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroiddehydrogenase,3β-HSD)和类固醇生成急性调节蛋白(steroidogenicacuteregulatoryprotein,STAR)等类固醇激素合成基因的表达量极显著降低(P<0.01)。与LPS组相比,LPS+EA组IL-1β和TNF-α的相对表达量极显著降低(P<0.01),IL-6有下降的趋势;CYP11A1和CYP19A1表达极显著上调(P<0.01)。ELISA结果表明,与对照组相比,LPS组E2的分泌量显著降低(P<0.05),P4的分泌量极显著降低(P<0.01),丙二醛(malondialdehyde,MDA)的浓度显著升高(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)浓度极显著升高(P<0.01);而与LPS组相比,LPS+EA组的E2和P4显著上调(P<0.05),GSH-Px、SOD和ROS浓度极显著降低(P<0.01),MDA的浓度有降低的趋势。结果表明,外源添加EA可起到缓解LPS诱导的OGCs炎性反应和氧化损伤,并能一定程度缓减LPS导致的OGCs功能性紊乱。本研究揭示了鞣花酸在保护卵巢颗粒细胞免受炎症反应和氧化损伤方面的潜在机制,为开发安全有效的天然抗炎抗氧化剂提供了理论依据,同时也为改善家畜繁殖性能和应对生殖系统相关疾病的研究提供了新的思路。
来源:2025年第6期
《农业生物技术学报》期刊编辑部