农业生物技术学报

作者：何永刚, 于天军, 何玉龙, 王新强, 李志杰, 王靖雷, 王萌, 李天昊, 潘阳阳, 徐庚全

单位：1 甘肃农业大学 动物医学院, 兰州 730070; 2 肃北蒙古族自治县 畜牧兽医技术服务中心, 酒泉 736300; 3 酒泉市畜牧兽医总站, 酒泉 736300; 4 甘肃省牛羊胚胎工程技术研发中心, 兰州 730070

关键词：牦牛,外泌体,孕酮,子宫容受性,

基金：国家自然科学基金地区项目(32160859);甘肃省重点研发计划(24YFNA015)

孕酮(progesterone,P4)是调控子宫内膜容受性与胚胎发育同步化、确保胚泡成功着床的重要生殖激素;外泌体具有良好的生物相容性、低免疫原性,是药物运输的优良载体。为了探究牦牛(Bosgrunniens)宫腔液源外泌体是否可作为激素、蛋白或RNA等药物的递送载体。本研究利用超高速离心法获取牦牛宫腔液外泌体,分别采用透射电子显微镜和蛋白免疫印迹法对其进行形态和标志蛋白(CD81,TSG101)鉴定后,通过腹腔注射小鼠(Musmusculus),分析小鼠器官的组织学变化,评价其安全性。将牦牛宫腔液外泌体与孕酮超声处理包装形成复合体,通过比较小鼠子宫内膜厚度、子宫受性标记物白血病抑制因子(leukemiainhibitoryfactor,LIF)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达水平,分析外泌体包装对孕酮作用效果的影响。结果显示,超高速离心法获取牦牛宫腔液外泌体形态典型,CD81和TSG101标记蛋白表达清晰。超声处理外泌体标记蛋白CD81和TSG101表达水平下降,分别为对照组的0.74和0.83倍。外泌体包装孕酮的包装率为(48.4±1.29)%。通过组织学比较,助溶剂二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)作为外泌体包装孕酮助溶剂的最佳浓度为0.5%,牦牛外泌体对小鼠器官组织无损伤。外泌体包装后的孕酮可显著增加小鼠子宫内膜厚度,上调LIFmRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。孕酮处理组小鼠子宫内膜IL-6mRNA和蛋白表达水平低于对照组,而外泌体包装的孕酮处理组IL-6表达水平增加。结果表明,牦牛宫腔液外泌体可以作为孕酮有效药物递送载体,可显著提高孕酮生物利用度。本研究为生殖道外泌体在动物生殖调控中的应用提供理论参考。

来源：2025年第6期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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