农业生物技术学报

作者：王丽娅, 王靖涵, 周慧敏, 章瑶, 陈文强, 鲁志国, 朱丽娜, 唐其

单位：1 湖南农业大学 园艺学院, 长沙 410128; 2 中南林业科技大学 风景园林学院, 长沙 410128

关键词：七叶一枝花,尿苷二磷酸糖基转移酶(UGTs),生物信息学,原核表达,qPCR,

基金：湖南省教育厅项目(22C0106);湖南农业大学创新训练项目(XCX2023160)

重楼皂苷是七叶一枝花(Parispolyphyllavar.chinensis)重要的活性成分,其生物合成途径尚未完全阐明,有研究表明尿苷二磷酸糖基转移酶(UDP-Glycosyltransferases,UGTs)是重楼皂苷下游生物合成途径的关键酶。本研究基于七叶一枝花转录组与重楼总皂苷含量关联分析,筛选出1个糖基转移酶候选基因PpUGT2(GenBankNo.PQ588702),可能参与七叶一枝花重楼皂苷的生物合成。利用PCR技术克隆PpUGT2基因全长,并对其进行生物信息学分析。在此基础上构建了PpUGT2的原核表达载体,IPTG诱导其表达,纯化重组蛋白。同时,结合qPCR技术,分析PpUGT2基因在七叶一枝花不同部位的表达模式。结果显示,PpUGT2基因全长1773bp,编码蛋白质由590个氨基酸组成,其蛋白相对分子质量为64.6kD,是不稳定且具有良好脂溶性的亲水蛋白。SDS-PAGE分析结果显示,在分子量约为64.6kD的位置上出现了蛋白条带,表明成功诱导PpUGT2重组蛋白的表达。此外,qPCR结果表明,PpUGT2基因在七叶一枝花的根、茎、叶和幼果中均有表达,表达模式为根>茎>叶>幼果,推测该基因主要在根中发挥作用。本研究丰富了UGT在七叶一枝花中的研究,为进一步解析重楼皂苷生物合成途径提供一定的理论基础。

来源：2025年第6期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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