农业生物技术学报

作者：李红欢, 刘庆庆, 乔彦杰, 王文星, 侯晖琳, 张彦兵, 王震, 陈创夫

单位：1 石河子大学 动物科技学院,石河子 832003; 2 教育部绵羊健康养殖与人兽共患病防控协同创新中心,石河子 832003

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),糖蛋白5 (GP5),表位,重组腺病毒,免疫原性,

基金：河北省重点研发计划(21322912D)

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)在我国常年呈现流行趋势,国内防控措施主要以灭活疫苗和减毒活疫苗为主,但其仍具有一定的局限性。本研究旨在研制一种安全高效的PRRS疫苗。通过生物信息学预测糖蛋白5 (glycoprotein 5, GP5)抗原表位集中区域,构建GP5抗原肽重组腺病毒,免疫小鼠(Mus musculus)后,评价其安全性、中和抗体效价、淋巴细胞干扰素-γ (interferon-gamma, IFN-γ)分泌水平、淋巴细胞增殖及细胞因子转录水平,分析其免疫效果。结果显示,经PCR和酶切鉴定,成功构建了重组腺病毒质粒pAdTrack-GP5aa130-170;对包装后的腺病毒进行Western blot鉴定,构建了能稳定表达目的蛋白的重组腺病毒。重组腺病毒免疫小鼠后,增重变化和精神状态良好。中和抗体效价、淋巴细胞IFN-γ释放水平及淋巴细胞增殖率显著高于对照组(P<0.05),与商品苗相比差异不显著。淋巴细胞白细胞介素4 (interleukin 4, IL-4)、IL-6、IL-10转录水平极显著高于对照组和商品苗组(P<0.01),而肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α) 表达量无显著差异;血清中的IL-4、IFN-γ和TNF-α分泌量极显著高于对照组(P<0.01)。以上结果表明,本研究成功构建了表达GP5抗原表位区域的重组腺病毒,免疫小鼠后可诱导产生较高的中和抗体和细胞免疫反应,具有良好的免疫原性。研究结果为PRRS新型疫苗的研制提供了参考。

来源：2025年第8期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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