农业生物技术学报

作者：张丰裕, 蔡燕子, 史艳, 纪鹏, 华永丽, 袁子文, 魏彦明

单位：甘肃农业大学 动物医学院,兰州 730070

关键词：仔猪腹泻,大肠杆菌,黄连解毒汤,耐药基因,毒力基因,

基金：甘肃省自然科学基金(25JRRA364); 甘肃省青年科技基金计划(21JR7RA846); 甘肃农业大学公招博士科研启动项目(GAU-KYQD-2020-4); 财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系(CARS-37)

大肠杆菌(Eschericha coli)是引起仔猪(Sus scrofa domesticus)腹泻的主要病原菌,黄连解毒汤(huang-lian-jie-du decoction, HLJDD)可用于防治畜禽大肠杆菌性腹泻,然而其是否能作用于病原菌,降低其致病性,目前鲜有报道。为探究HLJDD对猪源腹泻大肠杆菌致病性的影响,本研究采集腹泻仔猪肛拭子样本32份,通过细菌分离培养、生化/分子生物学鉴定及毒力基因检测筛选潜在致病菌株,进行对小鼠(Mus musculus)的致病性分析、药敏实验和耐药基因检测。在此基础上,采用HLJDD进行干预,测定其最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC),并采用qPCR检测其对致病菌株毒力和耐药基因的影响。最后,借助小鼠致病性实验探究HLJDD干预对小鼠存活率的影响。结果表明,共分离出21株菌,经生化和16S rRNA基因检测分离菌均鉴定为大肠杆菌。毒力基因检测结果显示,仅有3株分离菌携带强毒力岛(high pathogenicity island, HPI)基因—铁可抑制蛋白(iron regulatory protein 2, irp2)。随机选择1株携带irp2基因的分离菌进行小鼠致病性实验,结果表明,该菌株具有致病性,其半数致死量(median lethal dose, LD50)为4.4×106 CFU。药敏试验和耐药基因检测结果显示,该致病菌株对青霉素、四环素和红霉素等9种抗生素耐药,并携带Temoneira β-内酰胺酶(temoneira beta-lactamase, TEM)和四环素耐药蛋白 A (tetracycline resistance protein A, tetA)耐药基因。HLJDD对该致病菌的MIC为250 mg/mL,其干预可显著抑制该致病菌irp2、TEM和tetA的表达,并降低该致病菌对小鼠的致死率,延长小鼠生存时间。本研究为猪场仔猪腹泻的防治提供参考,为新型抗菌药物研发奠定基础。

来源：2025年第8期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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