农业生物技术学报

作者：林谦, 王立斌, 赵波, 王萌, 潘阳阳, 焦正兴, 许瑞华, 张晖, 余四九

单位：1 甘肃农业大学 动物医学院,兰州 730070; 2 甘肃省家畜胚胎工程技术创新中心,兰州 730070

关键词：柚皮素,藏羊,颗粒细胞,增殖与凋亡,雌二醇(E2),

基金：国家自然科学基金(32273091; 32473110); 甘肃省自然科学基金(22JR5RA864)

藏羊(Ovis aries)是中国青藏高原地区的主要经济动物,由于其繁殖能力弱,受孕率和妊娠率低,以致种群发展受到限制。因此,进行藏羊繁殖相关问题的研究具有重要意义。本研究旨在研究柚皮素(naringenin, NAR)对藏羊颗粒细胞(granulosa cells, GCs)增殖、凋亡和雌二醇(estradiol, E2)合成的影响。采集并培养藏羊原代GCs至对数生长期,添加不同浓度NAR (0, 5, 10, 15和20 μmol/L)培养12 h,采用qPCR和Western blot方法检测其增殖(PCNA, CCND1)、凋亡(Bcl-2, BAX, Caspase-3)和E2合成(CYP19A1, CYP17A1, CYP11A1, STAR)相关基因和蛋白的表达;采用CCK-8检测GCs细胞增殖水平,免疫荧光(immunofluorescence, IF)检测GCs的凋亡;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测培养液中E2的浓度。结果显示,添加10 μmol/L NAR使CCND1 mRNA表达显著上调(P<0.05);不同浓度NAR处理后,处理组增殖相关蛋白(PCNA, CCND1)表达显著高于对照组(P<0.05);处理组凋亡相关基因及蛋白(BAX, Caspase3)表达均显著降低(P<0.05)。10 μmol/L NAR处理组E2合成相关基因及蛋白(CYP11A1, CYP17A1和CYP19A1)表达水平显著上调(P<0.05),STAR mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。综上,NAR可通过上调PCNA、CCND1、Bcl-2 mRNA及下调BAX、Caspase3蛋白表达量,促进GCs增殖,并抑制其凋亡;通过上调CYP11A1、CYP17A1、CYP19A1和下调基因STAR mRNA及蛋白促进E2合成。本结果为进一步研究NAR对哺乳动物卵巢机能的影响和改善动物生殖潜力提供理论依据。

来源：2025年第8期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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