农业生物技术学报

作者：王艳, 高亚东, 蒋成辉, 葛俊伟, 曾巧英

单位：1 甘肃农业大学 动物医学院,兰州 730070;2 东北农业大学 动物医学院,哈尔滨 150030

关键词：禽腺病毒4型(FAdV-4),fiber2蛋白,结构域,可溶性表达,免疫原性,

基金：国家科技支撑计划(2015BAD11B02); 青岛市企业技术创新重点项目(LX202401.0225)

血清4型禽腺病毒(fowl Adenovirus serotybe 4, FAdV-4)引发的高致病性肝炎-心包积液综合征(hydropericardium hepatitis syndrome, HHS)对我国养禽业造成严重威胁,其防控亟需高效疫苗。fiber2蛋白作为病毒关键保护性抗原,其截短表达策略与免疫机制尚不明确,制约了亚单位疫苗的产业化应用。为探究FAdV-4 fiber2蛋白不同结构域的免疫特性和应用潜力,开发安全、高效且更适用于养禽业的疫苗。本研究通过生物信息学软件分析确定FAdV-4 fiber2抗原性和亲水性较好的区域。选择fiber2全基因、fiber2基因184~1 440 bp序列和841~1 440 bp序列,分别构建重组质粒pET30a-FF、pET30a-FS和pET30a-FK。并利用大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统,获得FAdV-4 fiber2蛋白的全长(FF)、截短(FS)及knob (FK) 3个重组蛋白,将其制备成亚单位疫苗,接种SPF雏鸡(Gallus gallus domesticus),评价其免疫原性。结果显示,3个蛋白均以可溶性表达为主。以30 μg/羽的免疫剂量免疫SPF鸡,攻毒后均可产生100%的保护,其中FS蛋白可以诱导比全病毒灭活疫苗更快更强的特异性抗体应答,并在低中和抗体(neutralizing antibody, NAb)水平下实现完全的攻毒保护。最小免疫剂量试验结果表明,FS重组蛋白以10 μg/羽的免疫剂量接种鸡群,即可对FAdV-4强毒株实现100%的保护。综上,本研究创新性建立了FAdV-4 fiber2高效可溶性表达体系,开发的FS蛋白抗原兼具快速免疫应答(14 d)与低剂量保护的特性(10 μg/羽),为进一步研究fiber2蛋白的免疫特性提供了基础数据,也为FAdV新型疫苗的产业化开发提供了理论参考与技术储备。

来源：2025年第9期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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