农业生物技术学报

作者：吕占民, 张振良, 刘昱成, 王晶晶, 刘伟俊, 唐玲, 华雨萱, 倪建宏, 万鹏程, 卢春霞, 刘长彬

单位：1 新疆农垦科学院 畜牧兽医研究所,石河子 832000;2 省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室,石河子 832000;3 长江师范学院 现代农业与生物工程学院,重庆 408100

关键词：军垦肉羊,早期妊娠,高通量测序,外泌体,miRNA,

基金：新疆农垦科学院第三期高层次人才“领军人才”培养计划; 自治区羊产业技术体系石河子综合试验站项目(XJARS-09-26); 新疆维吾尔自治区“天山英才”培养计划青年科技拔尖人才项目—青年科技创新人才(2022TSYCCX0124); 新疆农垦科学院院级项目(2024YJQN13)

早期妊娠是影响绵羊(Ovis aries)繁殖过程的主要因素之一,精准识别未受孕绵羊,可以有效缩短空怀期,提高繁殖效率。外泌体(exosome)是细胞分泌的一种直径在30~150 nm的细胞外囊泡,几乎参与到哺乳动物妊娠的整个过程。本研究以年龄在2~3岁的军垦肉羊为研究对象,采集3只军垦肉羊母羊非妊娠(0 d)与妊娠早期(14, 30 d)血浆,通过分离血浆外泌体,构建妊娠早期不同时间点的军垦肉羊血浆外泌体miRNA文库,分析发现在妊娠早期不同时间点的军垦肉羊血浆外泌体中,存在显著差异表达的miRNA。通过文库分析和比对,共检测出248个差异表达的miRNAs,其中已知miRNAs有79个,未知miRNAs有169个;妊娠14 d与妊娠0 d相比发现40个差异表达的miRNAs,其中30个上调,10个下调,妊娠30 d与妊娠0 d相比发现72个差异表达miRNAs,其中43个上调,29个下调;妊娠30 d与妊娠14 d相比发现35个差异表达miRNAs,其中9个上调,26个下调。通过BLAST软件比对GO、KEGG等数据库信息,对军垦肉羊差异表达的外泌体miRNA进行靶基因注释与功能富集,发现富集的生物过程与早期妊娠的过程相关。其中oar-miR-27a的表达量较高且在非妊娠0 d与妊娠14 d、30 d相比差异显著,推测其在绵羊早期妊娠和早期胚胎发育过程发挥作用。为证明测序结果的可靠性,本研究随机选取5个差异表达miRNA,使用荧光定量PCR技术对表达量进行检测,检测结果与高通量测序趋势基本一致。本研究发现血浆外泌体miRNA可能参与了军垦肉羊早期妊娠的调控,对绵羊早期妊娠调控过程提供了新的见解,为探讨差异外泌体在绵羊早期妊娠中的分子调控机制提供了理论依据。

来源：2025年第9期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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