农业生物技术学报

作者：胡广, 罗亮, 赵文军, 王智, 付伟, 于艳雪, 田茜, 王梦雨, 翟俊峰

单位：中国检验检疫科学研究院,北京 100176

关键词：快速检测,重组酶聚合酶扩增,侧向流动试纸条,CRISPR/Cas12b,基因编辑,

基金：中国检验检疫科学研究院基本科研业务费项目(2024JK023)

当前基因编辑产品检测多依赖于基因组测序分析和PCR等方法,这些方法耗时长、成本高,且需要大型仪器设备。为建立一种快速、灵敏、可视化并适用于基因编辑作物检测的方法,本研究根据水稻(Oryza sativa)蔗糖转运蛋白14 (sugar will eventually be exported transporter 14, SWEET14)基因编辑材料设计特异性引物及单链向导RNA (single guide RNA, sgRNA),采用重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification, RPA)与CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas (CRISPR-associated protein) 12b技术并结合侧流层析试纸条(lateral flow strips, LFS)检测基因编辑水稻。结果表明,RPA-CRISPR/Cas12b系统结合LFS方法在最多33 min内便可使检测结果通过试纸条可视化呈现,检测灵敏度为100 fg/μL。本研究开发的RPA-CRISPR/Cas12b-LFS检测方法操作简便、快速,不需要大型仪器设备,可为实验条件有限的现场快速检测提供技术支撑。

来源：2025年第10期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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