国内刊号:11-3342/S
国际刊号:1674-7968
发布日期:
作者:张敬敬, 付佳佳, 刘娜, 韩胜芳, 侯春燕, 王冬梅
单位:华北作物改良与调控国家重点实验室/河北省植物生理与分子病理学重点实验室/河北农业大学 生命科学学院,保定 071001
关键词:禾谷丝核菌,GFP,遗传转化,荧光标记,定殖模式,
基金:中央引导地方科技发展资金项目(科技创新基地项目)(2020-2022; 206Z6502G)
小麦(Triticum aestvum)纹枯病作为一种常见的土传真菌病害,已成为制约小麦产量的重要因素。本研究以禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)为研究对象,以聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)介导的遗传转化体系,获得带有GFP标记的能够稳定遗传的转化子;将该转化子侵染小麦,通过徒手切片观察,明确了禾谷丝核菌在小麦中的定殖规律。研究发现,通过PEG介导将携带GFP的质粒转入原生质体,并在含有100 mg/mL潮霉素的PDA培养基中进行筛选,获得了阳性转化子。经PCR检测及荧光观察,表明携带GFP的质粒已成功转入禾谷丝核菌中。经过连续传代培养,阳性转化子能够稳定表达,且其致病性与野生型一致。在小麦接种转化子后第4天,可在小麦根部木质部观察到明显荧光,第7天在小麦胚芽鞘韧皮部也可观察到明显荧光。本研究成功获得了带有GFP标记且具有良好遗传稳定性的禾谷丝核菌,并初步阐明了禾谷丝核菌在小麦中的定殖规律,为后续深入研究禾谷丝核菌的致病机制及利用微生物菌剂防治纹枯病提供了理论依据。
来源:2025年第10期
《农业生物技术学报》期刊编辑部