农业生物技术学报

作者：赵丽梅, 赵利, 田洪岭, 高芬

单位：1 山西大学 中医药现代研究中心,太原 030006; 2 山西农业大学 经济作物研究所,太原 030031; 3 山西大学 应用化学研究所,太原 030006

关键词：蒙古黄芪,根腐病,尖孢镰刀菌,实时荧光定量PCR (qRT-PCR),检测体系,

基金：山西省自然科学研究面上项目(202103021224029); 山西省回国留学人员科研资助项目(2022-023)

尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是引起蒙古黄芪(Astragalus membranaceus var. mongholicus, AMM)根腐病的优势致病菌之一。为了快速准确地检测和定量黄芪植株及其种植地土壤中的尖孢镰刀菌,根据延长因子(elongation factor-1α, EF-1α)序列设计引物并验证其特异性,进而建立该病菌的实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, qRT-PCR)检测体系,并运用该体系对黄芪和土壤样本内的尖孢镰刀菌进行检测。结果表明,设计的引物FaeF2/FaeR2特异性良好;所建体系对黄芪中尖孢镰刀菌DNA的检测灵敏度为0.896 pg/μL,土壤中尖孢镰刀菌孢子量的检测限度为102个分生孢子/g;标准曲线的相关系数分别为0.998和0.973;重复性评价显示该方法可靠、稳定。利用qRT-PCR方法对黄芪和土壤样本进行检测,接种发病样本、疑似发病样本和土壤样本中,尖孢镰刀菌的总检出率分别为100%、66.7%和43.75%;尖孢镰刀菌在黄芪中的定殖量与病情指数正相关,且相同种植年限下,发病土壤中尖孢镰刀菌孢子数显著大于健康土壤。综上结果表明,所建方法适用于黄芪及土壤中尖孢镰刀菌的检测。本研究可为黄芪根腐病的快速诊断、准确评价及土壤预警提供技术支持。

来源：2024年第3期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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