农业生物技术学报

作者：马伟, 王熙豪, 张雪妍

单位：1 海南师范大学 生命科学学院/海南省热带动植物生态学重点实验室,海口571158;2 海南省东寨港红树林湿地生态系统野外科学观测研究站,海口 570105;3 海南省海口市长流中学,海口 570312

关键词：海马齿,八氢番茄脱氢酶(PDS)基因家族,序列分析,病毒诱导的基因沉默(VIGS),载体构建,

基金：海南省自然科学基金(2019RC185)

海马齿(Sesuvium portulacastrum)是一种肉质盐生植物,对高盐胁迫具有极强的耐受性,病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)是鉴定植物基因功能的重要研究手段,为在耐盐植物海马齿中建立高效的VIGS体系,验证植物耐受逆境胁迫基因的功能,本研究以三亚海马齿为材料,选取八氢番茄脱氢酶(phytoene desaturase, PDS)基因作为标记基因。根据转录组数据通过本地Blast等生物信息学手段鉴定得到5个海马齿PDS家族成员,利用PCR获得5个成员的公共序列(长度为431 bp)构建SpTRV2-PDS沉默表达载体,经根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101转化后通过注射对植株进行侵染,对其表型进行观察,并测定其类胡萝卜素含量变化和PDS基因表达量。结果显示,经注射侵染后,海马齿植株出现生长缓慢及叶片逐渐发黄的症状,7 d后叶片出现白化现象,并可持续存在该表型;与对照组相比,实验组中类胡萝卜素含量和PDS的相对表达量降低,说明成功构建了海马齿的VIGS体系,表明VIGS体系能够有效沉默海马齿中PDS基因。本研究为鉴定海马齿耐盐基因功能提供了技术手段。

来源：2024年第4期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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