农业生物技术学报

作者：韩丹, 张心雨, 王小敏, 肖怡铭, 裴智勇, 谷守芹, 刘玉卫, 巩校东

单位：1 河北农业大学 生命科学学院/河北省农业微生物生物信息利用技术创新中心/河北省植物生理与分子病理学重点实验室,保定 071001; 2 河北农业大学 现代科技学院,保定 071001; 3 北京市计算中心 生物计算事业部,北京 100094

关键词：玉米大斑病菌,转录因子bHLH,StbHLH10基因,侵染表达,原核表达,

基金：国家自然科学基金(31671983); 中央引导地方科技发展资金(216Z2902G); 现代农业产业技术体系专项(CARS-02)

碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix, bHLH)转录因子家族广泛参与植物病原真菌的生长发育和侵染致病过程。StbHLH10是玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)中编码bHLH类转录因子的基因,为了解该基因的功能,本研究以玉米大斑病菌为材料克隆了StbHLH10 (GenBank No. XP_0080332037.1) CDS全长,并对其序列和结构特征进行了分析。结果显示,该基因CDS全长1 659 bp,编码552个氨基酸,其编码的蛋白质序列在第335~441位氨基酸残基处含有1个HLH保守结构域,由2个α-螺旋和1个Loop环构成特定空间结构;表达模式分析显示,StbHLH10基因的表达量随着病菌侵染玉米叶片的时间延长而增加;通过构建其调控网络发现,StbHLH10可能通过调控33个下游靶基因的表达参与病菌的生长发育和侵染过程;原核诱导表达分析发现,在28 ℃诱导6 h条件下StbHLH10-His融合蛋白在大肠杆菌(Escherichia coli)中高效表达,分子量为78.5 kD,与理论值一致,并通过镍柱亲和层析获得该转录因子可溶性的纯化蛋白。本研究初步探究了StbHLH10转录因子的功能,为进一步研究该基因的作用机制提供数据支持。

来源：2024年第5期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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