农业生物技术学报

作者：桑雷, 高承芳, 孙世坤, 王锦祥, 陈冬金, 谢喜平

单位：福建省农业科学院 畜牧兽医研究所/福建省畜禽遗传育种重点实验室,福州 350013

关键词：兔,促性腺激素抑制激素(GnIH),神经肽FF受体1基因(NPFFR1),克隆,基因表达,

基金：国家兔产业体系福州综合试验站项目(CARS-43-G-5); 福建省自然科学基金(2021J01486); 福建省科技计划公益类专项(2021R10260014; 2022R1026003); 福建省农业科学院科技创新团队建设项目(CXTD2021006-2-2)

神经肽FF受体1 (neuropeptide FF receptor 1, NPFFR1)是促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone, GnIH)的主要受体,在调控动物生殖生理方面起着重要作用。为了解NPFFR1基因的功能,本研究以闽西南黑兔(Oryctolagus cuniculus)为研究对象,采用cDNA末端快速克隆(rapid amplification of cDNA ends, RACE)技术克隆了NPFFR1基因(GenBank No. OP791886),并对其进行了生物信息学和时空表达谱分析;此外,公兔腹腔注射0、0.5、5和50 μg GnIH多肽,利用qPCR方法检测下丘脑-垂体-睾丸(hypothalamic-pituitary-testicular, HPT)轴中NPFFR1基因的表达水平。生物信息学分析表明,兔NPFFR1全长3 712 bp,编码432个氨基酸;其翻译的蛋白由α螺旋、无规卷曲和β折叠组成,是镶嵌于质膜的7次跨膜蛋白,与高原鼠兔(Ochotona curzoniae)和北美鼠兔(Ochotona princeps) NPFFR1高度同源。qPCR结果表明,NPFFR1基因在HPT轴中均有表达,在下丘脑的表达量显著高于垂体和睾丸(P<0.05)。出生后,90日龄兔下丘脑NPFFR1基因表达量显著低于11、30、60和150日龄(P<0.05),30和120日龄兔垂体NPFFR1基因表达量显著低于11和90日龄(P<0.05),30日龄兔睾丸NPFFR1基因表达量显著低于11和90日龄。兔腹腔注射5~50 μg GnIH多肽后,下丘脑NPFFR1基因表达量呈现剂量依赖性增加;50 μg剂量组睾丸NPFFR1基因表达量显著大于5 μg剂量组(P<0.05);注射4种剂量GnIH多肽都未引起垂体NPFFR1表达量发生改变。本研究为深入探讨兔NPFFR1在生殖生理方面的作用机制提供基础资料。

来源：2024年第5期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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