农业生物技术学报

作者：马卓媛, 杨玢, 陈云龙, 樊港, 吴晓龙, 王希音, 华进联, 王妍, 张永强, 张仕强

单位：1 西北农林科技大学 动物医学院/陕西省干细胞工程技术研究中心,杨凌 712100; 2 西北农林科技大学 家畜生物学重点实验室,杨凌 712100; 3 中国动物卫生与流行病学中心,青岛 266032

关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ),干扰素β (IFNβ),免疫沉淀-质谱联用,先天免疫,翻译调控,

基金：国家自然科学基金(32072856); 国家级大学生创新创业训练计划项目(202210712123)

过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)在肺泡巨噬细胞中特异性高表达,具有代谢和免疫调控作用。在先天免疫诱导产生Ⅰ型干扰素过程中,PPARγ究竟与哪些互作蛋白共同参与该过程的调控目前尚不清楚。本研究利用慢病毒载体系统构建了稳定过表达PPARγ-3×Flag的野猪(Sus scrofa)肺细胞系(wild boar lung cell line, WSL)。以该细胞为模型,通过荧光定量PCR检测发现,添加PPARγ激动剂罗格列酮能显著降低双链DNA模拟物Poly (dA:dT)刺激诱发的干扰素β (interferon β, IFNβ)表达水平;相反,添加PPARγ抑制剂T0070907能显著提高Poly (dA:dT)刺激引起的IFNβ表达水平。进一步利用抗Flag蛋白的免疫磁珠富集沉淀调控上述过程的PPARγ-3×Flag蛋白复合物,将细胞质蛋白和细胞核蛋白富集的PPARγ-3×Flag复合物分别消化成肽段,利用液相色谱-串联质谱联用(liquid chromatograph-tandem mass spectrometer, LC-MS/MS)进行检测分析。结果发现,在添加PPARγ激动剂的条件下,与PPARγ特异互作的胞质蛋白有101个,胞核蛋白有95个;在添加PPARγ抑制剂的条件下,与PPARγ特异互作的胞质蛋白有24个,胞核蛋白有14个。GO和KEGG分析表明,与PPARγ特异互作的胞质蛋白和核蛋白均与翻译调控相关。本研究为深入探究PPARγ调控IFNβ表达机制提供了新线索。

来源：2024年第5期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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