农业生物技术学报

作者：孙贺贺, 王程泽, 贾京哲, 申珅, 郝志敏, 董金皋

单位：河北农业大学 华北作物改良与调控国家重点实验室/河北省农业微生物生物信息利用技术创新中心/河北省植物生理与分子病理学重点实验室,保定 071000

关键词：玉米大斑病菌,Flocculation 8 (Flo8),谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白沉降技术,互作蛋白,

基金：河北省自然科学基金(C2021204112; C2020204172); 国家玉米产业技术体系(CARS-02)

Flo8 (flocculation 8)基因是cAMP途径下游的关键转录调控因子,在真菌生长发育调控中发挥重要作用。本课题组前期初步明确了玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica) StFlo8基因参与调控其附着胞发育及侵染丝形成。本研究利用大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统对该基因与谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase, GST)标签进行异源表达,进一步通过GST融合蛋白沉降技术(GST pull-down)从玉米大斑病菌菌丝蛋白中筛选可能与StFlo8有互作关系的蛋白,并通过酵母双杂交对其中部分蛋白进行互作关系的验证。结果表明,原核表达获得大小为116 kD的目标产物,与GST-StFlo8大小一致。将成功纯化的表达产物经GST pull-down,共获得41种和StFlo8可能有互作关系的蛋白。挑选其中部分蛋白进行酵母双杂交验证,发现Flo8与FAD依赖性氧化还原酶(FAD-dependent oxidoreductase)(GenBank No. 165285)有互作关系。本研究初步明确了StFlo8的互作蛋白,为进一步解析玉米大斑病菌StFlo8活性调控分子机制提供了有效参考。

来源：2024年第6期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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