农业生物技术学报

作者：龙海成, 马燕勤, 周玉洁, 常伟, 李菊, 李志, 苗明军, 杨亮

单位：1 四川省农业科学院 园艺研究所 蔬菜种质与品种创新四川省重点实验室/农业农村部西南地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,成都 610066;2 四川省蔬菜工程技术研究中心,彭州 611934;3 四川省食用菌研究所,成都 610066;4 四川农业大学 资源学院,成都 611130

关键词：番茄,CRISPR/Cas9,八氢番茄红素合成酶1 (PSY1),基因编辑,黄果番茄,

基金：国家现代农业产业技术体系四川省蔬菜创新团队(蔬菜分子辅助育种岗位)项目〔川农函(2019)472号〕; 四川省科技计划项目(2021YFYZ0022; 2023NSFSC0162); 四川省财政自主创新专项项目(2022ZZCX050)

目前国内市场上优异黄果番茄(Solanum lycopersicum)品种相对稀缺,为了满足市场需求,提高种业竞争力,本研究以'MoneyMaker' ('MM')番茄为材料,利用CRISPR/Cas9技术,对番茄八氢番茄红素合成酶1 (phytoene synthase 1, SlPSY1)基因(Solyc03g031860)进行定向基因编辑来创制黄色果实番茄。选择SlPSY1基因外显子区域2个序列特异的sgRNA作为靶位点,构建CRISPR/Cas9双元表达载体pKSE401,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的叶盘转化法对'MM'番茄材料进行遗传转化。结果显示,16株再生苗中鉴定出了12株阳性转基因植株,阳性转化率为75%;对阳性转基因植株的靶位点测序分析发现,有8株在2个靶位点上共发生21次编辑事件,基因编辑效率为66.7%,且均未发生脱靶现象;获得的突变植株中有5株在成熟期果实表现为黄色。本研究利用CRISPR/Cas9技术在'MM'番茄上成功创制了SlPSY1基因编辑材料,为今后快速创制番茄黄果资源提供技术及材料基础。

来源：2024年第7期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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