农业生物技术学报

作者：刘世昊, 魏志恒, 姜新城, 闫耀华, 徐璐, 郁建锋, 顾志良

单位：常熟理工学院 生物与食品工程学院,常熟 215500

关键词：鸡,甲状腺激素应答spot 14 (THRSP),脂质代谢,鸡肝癌细胞系LMH (Leghorn male hepatoma),

基金：江苏省自然科学基金(BK20191476); 常熟理工学院2023大学生创业创新计划资助

甲状腺激素应答spot 14 (thyroid hormone responsive spot 14, THRSP)是一种转录调控因子,参与组织的脂类代谢调控。为探讨THRSP基因在鸡(Gallus gallus)脂质代谢中的作用及调控机制,本研究检测了THRSP基因在鸡12种组织中的表达情况;以鸡脂肪组织总RNA的反转录产物为模板,扩增获得THRSP基因全长CDS序列,并构建其真核表达载体;在鸡肝癌细胞系LMH (Leghorn male hepatoma)中过表达和敲低THRSP基因的表达,通过油红O染色检测脂滴沉积,利用比色法测定总胆固醇(total cholesterol, TC)和总甘油三酯(total triglyceride, TG)的变化,通过qRT-PCR方法检测脂质代谢相关基因的表达变化。结果显示,THRSP基因在鸡的肝脏和脂肪组织中高表达;Western blot检测显示,构建的过表达载体转染LMH细胞,能成功表达融合蛋白THRSP-Myc;THRSP基因过表达促进LMH细胞脂质沉积(P<0.01),TC (P<0.05)和TG (P<0.01)显著升高,过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)(P<0.01)和二酰甘油酰基转移酶2 (diacylglycerol acyltransferase 2, DGAT2)(P<0.05)基因表达显著上调,丙酰辅酶A羧化酶亚基α (propionyl-CoA carboxylase subunit α, PCCA)(P<0.05)和磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1 (phosphoenolpyruvate carboxykinase 1, PCK1)(P<0.001)基因表达显著下调。敲低THRSP基因抑制LMH细胞脂质沉积(P<0.05),TC和TG含量有下降趋势(P=0.06),DGAT2基因表达显著下调(P<0.05),PCCA (P<0.01)和PCK1 (P<0.001)基因表达显著上调。上述结果表明,THRSP基因可能通过调节PPARγ、DGAT2、PCCA和PCK1基因表达而发挥对细胞脂质沉积的促进作用。本研究为深入探讨鸡THRSP基因功能提供新的参考。

来源：2024年第7期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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