农业生物技术学报

作者：倪芮, 罗悠悠, 黄渺, 蔡骏一, 何奕含, 刘文霖, 姚依妮, 肇瑾

单位：1 贵州大学 农学院,贵阳 550025;2 贵州大学 辣椒产业技术研究院,贵阳 550025

关键词：红肉火龙果,HpTCP9,基因克隆,干旱胁迫,

基金：贵州省高等学校科技拔尖人才项目(黔教合KY字KY[2021]028); 国家自然科学基金(32260799); 贵州大学重点培育项目([2019]42号)

TCP (teosinte branched1/cycloidea/proliferating cell factor)是植物特有的转录因子,广泛参与植物的生长发育和应答环境胁迫过程。TCP9是TCP基因家族Ⅰ类成员,在植物应答干旱非生物胁迫中发挥重要作用。火龙果(Hylocereus)具有很强的抗旱性,是研究植物抗旱的理想材料。为探究TCP9基因在火龙果抗旱性中的生物学功能,本研究以红肉火龙果(Hylocereus polyrhizus)品种'大红'为供试材料,利用RT-PCR技术对红肉火龙果HpTCP9基因进行克隆。克隆出的HpTCP9 (GenBank No. OR145855.1)基因ORF长729 bp,编码242个氨基酸,分子量为24.86 kD,等电点为5.04,亲水指数为1.021。结构域分析表明,HpTCP9蛋白含有1个典型的TCP保守结构域。蛋白结构预测结果表明,HpTCP9蛋白的氨基酸中α螺旋占比12.40%,无规则卷曲占比66.12%,延伸链占比12.81%,β转角占比8.68%。构建携带GFP标签的pCAMBIA2300-HpTCP9-GFP过表达载体,通过拟南芥(Arabidopsis thaliana)原生质体转化法检测出HpTCP9为核定位蛋白。实时荧光定量PCR分析HpTCP9在干旱处理下的表达模式,结果表明,HpTCP9基因在20% PEG6000模拟干旱处理诱导下显著上调表达,表达量与处理时长呈正相关。综上,HpTCP9属于TCP家族Ⅰ类亚家族成员,具有TCP保守结构域,是定位于细胞核的疏水蛋白,且在火龙果的干旱耐受性方面发挥功能。本研究为深入探究火龙果HpTCP9基因功能提供理论依据。

来源：2024年第7期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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