农业生物技术学报

作者：周应聪, 张同享, 王靖雷, 赵凌, 张瑞, 姚颖, 钱文洁, 崔燕, 余四九, 樊江峰

单位：1 阿拉善左旗动物疫病预防控制中心,阿拉善左旗 750300; 2 甘肃农业大学 动物医学院,兰州 730070; 3 甘肃农业大学 甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心,兰州 730070

关键词：牦牛,黄体,哺乳动物STe20样激酶1 (MST1),大肿瘤抑制蛋白1 (LATS1),Hippo通路,HCG,

基金：国家自然科学基金(31660732); 甘肃省科技重点研发计划(农业类)项目(20YF8NA131); 陇原青年创新创业人才项目(2021LQGR47); 甘肃农业大学科技创新基金(青年导师基金)项目(GAU-QDFC-2018-10); 甘肃省高校基本科研业务费

哺乳动物STe20样激酶1 (mammalian STE20-like kinase 1, MST1)和大肿瘤抑制蛋白1 (large tumor suppressor kinase 1, LATS1)是Hippo通路核心激酶级联反应链的关键成员,参与雌性动物生殖过程并发挥重要作用。为探究MST1和LATS1与牦牛(Bos grunniens)黄体(corpus luteum, CL)形成、维持和退化之间的关系。本研究采集雌性牦牛黄体组织,按照黄体形成(红体期和有腔黄体期)、维持(妊娠黄体期)和退化(退化黄体期)的不同阶段将材料分为4组,通过qPCR和Western blot检测MST1和LATS1 mRNA及蛋白在黄体形成、维持和退化中的表达差异性,运用免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)对MST1和LATS1在黄体形成、维持和退化中进行定位分析。另外,分离培养牦牛卵巢颗粒细胞(granule cells, GC),通过添加人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, HCG)诱导颗粒细胞黄体化,采用qPCR、Western blot和免疫荧光(immunofluorescence, IF)等方法对MST1和LATS1 mRNA及蛋白在颗粒细胞黄体化前后进行定量和定位分析。结果显示,MST1和LATS1 mRNA及蛋白在牦牛黄体不同发育阶段表达量存在差异,在妊娠黄体期MST1表达量最高,而LATS1在有腔黄体期的表达最为丰富,在退化黄体期MST1和LATS1表达量均最低。IHC结果显示,在牦牛粒性黄体细胞中MST1和LATS1分布广泛,且MST1在血管内皮细胞中特征表达。添加5 IU/mL HCG诱导颗粒细胞黄体化后,MST1和LATS1 mRNA及蛋白的表达量极显著上升。通过IF染色发现,MST1和LATS1蛋白主要定位于颗粒细胞细胞质,且黄体化前后位置没有改变。研究结果表明,MST1和LATS1介导Hippo信号通路通过控制颗粒细胞分化,黄体细胞增殖和凋亡,参与雌性牦牛黄体组织的形成、维持、退化以及功能运转,并且与黄体生理过程中各类生殖激素密切相关。本研究为进一步探索Hippo信号通路对牦牛黄体组织大小调控以及调节哺乳动物生殖生理过程的作用机制提供了基础资料。

来源：2024年第8期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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