农业生物技术学报

北大核心,CA,JST,CSCD,

国内刊号:11-3342/S

国际刊号:1674-7968

农业生物技术学报杂志2024年第9期:基于Eu3+荧光微球的丁香酚时间分辨荧光免疫层析技术的建立

发布日期:

作者:宋妍灵, 翟璐, 李因来, 陈青舟, 廖杰, 金仁耀

单位:1 浙江工商大学 海洋食品研究院,杭州 310012; 2 杭州博岳生物技术有限公司,杭州 310018; 3 杭州南开日新生物技术有限公司,杭州 310000; 4 浙江华才检测技术有限公司,绍兴 311800

关键词:丁香酚,时间分辨荧光,免疫层析,试纸条,

基金:浙江省科技厅公益性研究项目(LGN22C200028)

丁香酚具有来源广、成本低、效果好且残留期短等优点,被广泛应用于渔业麻醉,但国际上对于其安全性存在争议,认为丁香酚类化合物对啮齿动物是致癌物或潜在的致癌物。为提供一种高效、简便适用于现场快速检测水产品中丁香酚残留的方法,本研究建立了丁香酚时间分辨荧光免疫层析技术并制备免疫层析试纸条,利用Eu3+标记的荧光微球和抗丁香酚单克隆抗体进行标记,先后对微球活化时间、荧光标记缓冲液pH值、标记抗体量、荧光微球用量及T线和C线包被浓度等参数进行优化,并在最优条件下制备免疫层析试纸条并对其性能进行评价。结果表明,在最优条件下制成的试纸条在0.05~0.40 μg/mL之间丁香酚标样浓度的对数值与T/C值具有良好的线性关系,标准曲线方程:y=-2.415lnx+2.589 4,R2=0.994,仪器检出限为0.1 μg/mL,表明试纸条具有良好的灵敏度。样品添加回收率试验表明,回收率在94.16%~109.27%范围内,批内和批间变异系数分别为2.00%~7.33%和2.73%~6.97%。利用新研发试纸条对丁香酚标样检测与传统的高效液相色谱检测方法相比结果一致。稳定性试验证明,本研究制备的试纸条的有效保质期至少为1年。本研究所建立的方法适用于水产品中丁香酚残留的快速检测,同时为开发丁香酚快速检测技术提供依据。

来源:2024年第9期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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