农业生物技术学报

作者：安而立, 嵇辛勤, 阮涌, 陈泽辉, 曹伟, 王晗晗, 罗晓宇, 龙丹丹, 陈佳琪, 杨纯培, 吴宗豪, 王丽娟, 姚碧琼

单位：1 贵州大学 动物科学学院,贵阳 550025; 2 贵州省动物疫病研究所,贵阳 550025; 3 贵州大学 高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵阳 550025; 4 贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室,贵阳 550025; 5 三穗县动物疫病预防控制中心,三穗 556500

关键词：鸭坦布苏病毒(DTMUV),NS3蛋白,ELISA,

基金：贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑[2022]一般137)

为了建立一种能够快速检测鸭坦布苏病毒病(Duck tembusu virus, DTMUV)抗体的间接ELISA检测方法,本研究构建了pET-28a-NS3的原核重组表达载体以诱导表达NS3蛋白,以NS3蛋白作为包被抗原,对试验条件进行优化,建立了一种检测DTMUV抗体的间接ELISA方法,使用所建立ELISA方法对30份攻毒试验血清样品及150份采集的血清样品进行检测。结果显示,所建立间接ELISA方法批内与批间变异系数(CV)分别为1.49%~4.31%和1.22%~6.07%,符合国标;该方法可特异性地检测出DTMUV抗体,且与禽流感病毒(Avian influenza virus, AIV) H5亚型、AIV H7亚型、新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)、鸭圆环病毒(Duck circovirus, DuCV)和鸭甲肝病毒1型(Duck hepatitis A virus, DHAV-1)阳性血清均无交叉反应;所建立方法对攻毒试验样品阳性、阴性检出数与商品化试剂盒检测符合率为100%,对养殖场采集样品阳性、阴性检出数与商品化试剂盒检测符合率为97.33%。综上所述,本研究所建立的DTMUV NS3蛋白抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性与重复性,为DTMUV流行病学调查提供了快速、有效的检测方法。

来源：2024年第10期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

查看农业生物技术学报杂志2024年第10期