农业生物技术学报

作者：汪玥, 吕琛, 姚丹, 赵兴绪, 张勇

单位：甘肃农业大学 动物医学院/甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室,兰州 730070

关键词：奶牛,胎衣不下,胎盘,miR-133a_R+1,乙醛脱氢酶5家族成员A1 (ALDH5A1),

基金：奶牛围产期疾病早期预警技术研发与示范(21JR7RA858); 甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室项目(20JR10RA563); 牛羊围产期群发普通病防控技术研发与示范甘肃省引导科技创新专项资金(GSCXZX-2019)

Micro RNA (miRNA)参与哺乳动物许多生理活动,其中miR-133a在胎盘和子宫生长发育过程中具有重要的调控作用。通过测序及靶基因预测软件发现miR-133a_R+1与ALDH5A1在胎衣不下奶牛(Bos taurus)胎盘组织中差异表达且可能存在靶向调控关系。本研究以正常排出及胎衣不下奶牛胎儿胎盘组织和健康奶牛子宫内膜上皮细胞(bovine endometrial epithelial cells, BEND)为实验对象,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin, HE)观察胎儿胎盘组织的病理变化,实时定量PCR (quantitative real-time PCR, qRT-PCR)检测miR-133a_R+1与乙醛脱氢酶5家族成员A1 (aldehyde dehydrogenase 5 family member A1, ALDH5A1)在胎儿胎盘组织中的表达情况,采用免疫组织化学法(immunohistochemistry, IHC)检测ALDH5A1蛋白在胎儿胎盘组织中的定位,选取转染效率最佳条件100 nmol/L、12 h构建过表达miR-133a_R+1的BEND细胞模型,通过qRT-PCR与Western blot检测细胞中ALDH5A1基因及其蛋白表达水平。结果显示,RP胎儿胎盘绒毛短而稀疏,零散破碎。RP胎儿胎盘组织中miR-133a_R+1基因的表达量极显著上调(P<0.01),ALDH5A1在结缔组织、细胞滋养层中表达且表达量极显著下调(P<0.01),过表达miR-133a_R+1的BEND细胞中ALDH5A1基因及蛋白表达水平均极显著下调(P<0.01)。实验结果表明,miR-133a_R+1通过靶向调控ALDH5A1的表达影响奶牛RP,为今后miRNA在奶牛RP中的作用机制研究提供了理论基础。

来源：2024年第11期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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