农业生物技术学报

作者：郝婷丽, 陈大群, 张燕, 杜珍珠, 吴勤, 刘升学

单位：石河子大学 分析测试中心,石河子 832003

关键词：籽用西葫芦(Cucurbita pepo),花叶病,dsRNA (double-stranded RNA),鉴定,

基金：石河子大学分析测试中心大型科研仪器共享平台开放课题(ZZZC2021116)

籽用西葫芦(Cucurbita pepo)是新疆主要的经济作物之一,病毒危害可导致其产量和品质严重下降,明确病原是进一步防治的基础。本研究从新疆石河子市采集表现花叶症状的籽用西葫芦叶片样品,在电子显微镜下观察到750×11 nm呈弯曲线状的马铃薯Y病毒属(Potyvirus)病毒粒子。提取病毒的双链RNA (double-stranded RNA, dsRNA),采用随机引物对病毒进行RT-PCR,得到弥散条带XHL2-1、XHL2-2和XHL56,在NCBI数据库中Blast搜索比对发现,XHL2-1和XHL56与小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV)对应区段的序列相似性分别为92.22%~98.69%和96.21%~99.64%;XHL2-2与西瓜花叶病毒(Water melon mosaic virus, WMV)对应区段的序列相似性在89.38%~98.45%;表明籽用西葫芦花叶病可能是由ZYMV和WMV侵染所致。进一步设计合成ZYMV和WMV的特异性引物,对15个供试样品进行RT-PCR,回收编号为SH2、SH12和SH13的ZYMV特异性扩增片段进行测序分析,结果表明,扩增片段之间的序列相似性超过99.29%,与GenBank中收录的ZYMV的序列相似性为96.09%~99.56%;编号为SH1、SH9和SH11的WMV特异性扩增片段之间的序列相似性超过94.30%,与GenBank中收录的WMV的序列相似性为94.74%~100%;进一步证明新疆籽用西葫芦花叶病是由ZYMV和WMV的复合侵染所致。系统进化树分析表明,侵染新疆籽用西葫芦的ZYMV与来源于东欧、印度等区域的分离物处于同一分支,WMV与来源于中国、法国等区域的WMV分离物亲缘关系较近。本研究明确了ZYMV和WMV的复合侵染是导致新疆籽用西葫芦花叶病害的主要病原,为进一步防治该病害提供理论依据。

来源：2024年第12期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

查看农业生物技术学报杂志2024年第12期