农业生物技术学报

作者：李逸, 徐欢欢, 张宇辰, 王永勤, 刘乐承

单位：1 长江大学 园艺园林学院,荆州 434025; 2 北京市农林科学院 蔬菜研究中心/农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,北京 100097

关键词：大葱,4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL),生物信息学,亚细胞定位,表达分析,

基金：国家自然科学基金(31972409); 北京市农林科学院科技创新能力项目(KJCX20200113)

4-香豆辅酶A连接酶(4-coumaric acid coenzyme A ligase, 4CL)是类黄酮合成途径的一个关键酶,催化羟基香豆酸形成香豆酰辅酶A,香豆酰辅酶A是植物类黄酮生物合成的起始底物。本研究以大葱(Allium fistulosum)为材料,克隆了编码大葱4-香豆酸辅酶A连接酶的基因Af4CL (GenBank NO. OP921007),并进行了生物信息学分析,同时对Af4CL基因进行亚细胞定位和原核表达系统分析;结果显示,Af4CL编码区全长1 644 bp,编码547个氨基酸;生物信息学分析表明,Af4CL具有2个保守结构域BoxⅠ和BoxⅡ;进化分析结果表明,大葱Af4CL与大蒜(Allium sativum) As4CL的亲缘关系最近。构建Pro35S：Af4CL-GFP载体,并利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的烟草(Nicotiana tabacum)叶片瞬时表达系统对Af4CL的定位进行了分析表明,Af4CL定位于细胞膜;利用原核表达系统成功诱导出目的蛋白。本研究为大葱类黄酮代谢的深入研究及类黄酮体外合成提供了参考。

来源：2023年第2期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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