农业生物技术学报

作者：李德娴, 王广, 陈璐, 余梦琦, 邹家浩, 张永涛, 袁宇欣, 张磊, 李广

单位：西北农林科技大学 动物科技学院 奶羊产业技术创新实验室,杨凌 712100

关键词：东湖F1代奶绵羊,冻精,串联质谱标签(TMT),蛋白质组学,生物标志物,

基金：陕西省农业协同创新与推广联盟(LMZD202002); 陕西省农业科技创新驱动项目(NYKJ-2021-ST-03)

奶绵羊(Ovis aries)精液低温保存过程中发生蛋白质组的变化,可能引发精子死亡或生育能力下降。为了明确新鲜和冻融公羊精液的差异表达蛋白,本研究利用人工阴道法采集18只东湖F1代奶绵羊公羊的精液,以甘油和卵黄作为主要冷冻保护剂进行冷冻保存,然后提取并纯化鲜精和冻精的总蛋白,通过串联质谱标签(tandem mass tag, TMT)技术进行蛋白质组学分析。结果显示,冷冻前后共筛选出936种蛋白质;以变化倍数(fold change, FC)>1.1且P<0.05为筛选条件,鲜精与冻精之间共存在22种差异蛋白,其中17种蛋白质表达上调、5种蛋白质表达下调,均参与精子代谢和生物过程的调控;GO富集分析显示,8个差异蛋白分别涉及精子的生物过程和细胞组分;通过KEGG对差异表达蛋白显著富集的信号通路进行分析,发现差异蛋白主要富集在新陈代谢、蛋白质代谢、凋亡等相关通路。选择2个上调和2个下调蛋白,通过Western blot检测其在鲜精和冻精中的丰度,结果显示,4种蛋白质的相对丰度与TMT蛋白质组学分析的结果相似,表明蛋白质组学数据可靠。本研究为东湖F1代奶绵羊精液冷冻损伤的蛋白标志物筛选提供基础资料。

来源：2023年第3期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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