农业生物技术学报

作者：农可懿, 房鑫, 刘又铭, 张海文

单位：海南大学 动物科技学院,海口 570228

关键词：抗菌肽,马盖宁Ⅱ,肠出血性大肠杆菌(EHEC),肠道炎症,肠道菌群,

基金：海南省自然科学基金(320RC463); 海南省高等学校教育教学改革研究资助项目(Hnjg2020-23); 海南大学教育教 学改革研究项目(hdjy2026)

O157:H7 是一种肠出血性大肠杆菌(enterohaemorrhagic Escherichia coli, EHEC)菌株,作为食源性 病原体可导致畜禽与人类(Homo sapiens)患病。马盖宁(magainins)是具有抗菌和抗肿瘤特性的阳离子肽,对革兰氏阴性和阳性菌具有抗菌活性。本研究旨在明确蛙(Xenopus laevis)源抗菌肽 MagaininⅡ对 EHECO157:H7 攻毒小鼠(Mus musculus)的肠道炎症及微生物区系的影响。以体重接近的 C57/BL6 雄性小鼠 40只为受试对象,随机分为 4 组(每组 10 只)：CK 组,O157 组,MagⅡ组,O157+MagⅡ组。在相同基础日粮条件下,分别在 1、5 和 9 d 对 O157 组和 O157+MagⅡ组以 0.1 mL O157 菌液(浓度为 106 CFU/mL)灌胃,CK 组 和 MagⅡ组灌胃相同体积的 PBS 溶液 ;1 h 后,MagⅡ组和 O157+MagⅡ组按照 5 mg/kg 体重,于腹腔注射0.25 mL MagaininⅡ溶液,CK 组和 O157 组注射相应体积的无菌生理盐水 ;10 d 后安乐处死全部受试小鼠,采集相应组织样本进行检测。结果表明,MagaininⅡ单独处理对小鼠血清炎性细胞因子浓度和空肠炎性细胞因子、屏障功能相关基因表达均无影响;EHEC O157: H7处理导致小鼠空肠白细胞介素 -6(interleukin-6, IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)基因表达水平及血清 IL-1β、IL-6、TNF-α 浓度显著升高(P<0.05),血清 IL-10 水平显著降低(P<0.05),空肠紧密连接蛋白 claudin-1、黏 蛋 白 -1 (mucin-1, MUC-1)、MUC-2 的表达水平显著降低(P<0.05);Magainin Ⅱ处理可显著改善EHECO157:H7导致的IL-1β、IL-6、TNF-α、claudin-1、MUC-1、MUC-2 基因表达及血清 IL-1β、IL-6、IL-10 浓度的异 常(P<0.05)。另外,本研究通过 16S rDNA 测序来分析 MagaininⅡ干预引起的肠道微生物变化。测序结果显示,在属水平上,O157 组中普氏菌属(Prevotella)和拟杆菌属(Bacteroides)相对丰度显著升高(P<0.05), O157+MagⅡ组拟杆菌属相对丰度降低(P<0.05),即 EHEC O157:H7 攻毒后与炎症发展相关的普氏菌属 和拟杆菌属丰度显著增加,MagaininⅡ处理使不利菌属拟杆菌属丰度显著下降,提示 MagaininⅡ可维持肠道屏障和缓解炎症水平,从而在 EHEC O157:H7 诱导的小鼠肠道损伤中发挥保护作用,肠道群菌的变化可能是 MagaininⅡ保护肠道损伤的相关因素。综上所述,MagaininⅡ可作为潜在药物用于治疗 EHECO157:H7 引起的肠道疾病。

来源：2023年第4期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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