农业生物技术学报

作者：魏芳, 蒋苏苏, 李帅兵, 符璐, 宋苏堤, 卢建雄, 张国华

单位：1 西北民族大学 生命科学与工程学院,兰州 730030; 2 甘肃农业职业技术学院 畜牧工程系,兰州 730000

关键词：猪,脂肪细胞,分化,选择性剪接,过氧化物酶体增殖物激活受体γΔ5(PPARγΔ5),

选择性剪接是真核生物精密调控组织细胞类型和发育的重要方式。过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPARγ) 是脂肪细胞分化的关键调控因子,其前体mRNA可能通过选择性剪接产生外显子5 跳跃的亚型 PPARγ∆5,影响脂肪细胞分化。本研究从3日龄仔猪(Sus scrofa)皮下脂肪组织中分离培养前体脂肪细胞,诱导分化,以 qPCR 检测基因 mRNA 表达。结果显示,PPARγ∆5 在猪脂肪细胞分化早期表达极显著提高,中期达到高峰,后期极显著降低(P<0.01),其变化趋势与 PPARγ 及富含丝氨酸/精氨酸剪接因子(serine/arginine-rich splicing factor 1, SRSF1)一致。PPARγ激动剂罗格列酮处理可极显著提高细胞PPARγ∆5 和 SRSF1 表达(P<0.01),而拮抗剂 GW9662 可极显著降低其表达(P<0.01)。构建PPARγ∆5-siRNA 重组慢病毒,转染猪前体脂肪细胞,PPARγ∆5 表达极显著降 低约 75% (P<0.01)。与转染阴性对照慢病毒和未转染细胞相比,PPARγ∆5 表达沉默显著促进前体脂肪细胞分化及 PPARγ 和脂肪酸结合蛋白 4 (fatty acid-binding protein 4, FABP4)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-CoA desaturase, SCD) 基因的表达(P<0.05),显著下调脂蛋白脂酶 (lipoprotein lipase, LPL)基因mRNA 表达(P<0.05)。本研究提示,猪脂肪细胞依赖SRSF1及 PPARγ 的表达和活性,通过选择性剪接产生 PPARγΔ5;PPARγΔ5 是脂肪细胞分化的抑制子,可能通过负调控 PPARγ 表达减弱猪前体脂肪细胞分化。本研究结果为揭示猪脂肪形成的机制提供了新的依据。

来源：2023年第4期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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