农业生物技术学报

作者：高玉红, 冯雪, 汪书哲, 户春丽, 李芬, 张路培, 杨润军, 马云

单位：1 宁夏大学 农学院/宁夏回族自治区反刍动物分子细胞育种重点实验室 ,银川 750021; 2 中国农业科学院 北京畜牧兽医研究所 ,北京 100193; 3 吉林大学 动物科学学院,长春 130062

关键词：circCAP2,黄牛,过表达,干扰,前体脂肪细胞分化,

基金：国家自然科学基金(32072720); 宁夏回族自治区科技创新领军人才培养项目(2020GKLRLX02); 宁夏回族自治区 重点研发计划(2021BEF01002; 2021NXZD1; 2019BEB04006)

环状 RNA (circular RNA, circRNA)在调节前体脂肪细胞的增殖和分化中起着重要作用。前期高通量测序结果显示,circRNA-环化酶相关肌动蛋白细胞骨架调节蛋白 2 (circRNA-cyclase associated actin cytoskeleton regulatory protein 2, circCAP2)在黄牛(Bos taurus)前体脂肪细胞分化前后表达具有差异性。为探讨 circCAP2 在前体脂肪细胞分化过程中的作用机制,本研究通过 Sanger 测序及 qPCR技术对 circCAP2 进行鉴定和表达模式分析。进一步利用过表达和干扰技术将其转染至黄牛前体脂肪细胞中,利用油红 O 染色方法检测脂肪细胞脂质积累情况,通过 qPCR 检测成脂标志基因表达,结果显示,circCAP2 是真实存在且稳定表达的 circRNA,在成熟的脂肪细胞中极高表达(P<0.01)。circCAP2 过表达实验表明,在黄牛前体脂肪细胞中,过表达 circCAP2 显著促进脂肪细胞的脂质累积,显著上调成脂标志基因过氧化物酶增殖激活受体 γ (peroxisome proliferator activated receptor gamma, PPARγ)、脂肪酸结合蛋白 4 (fatty acid binding protein 4, FABP4)、增强子结合蛋白 α (CCAAT/enhancer-binding protein α, C/EBPα)和 C/ EBPβ 的表达(P<0.05)。而 circCAP2 干扰实验显示,干扰 circCAP2 显著抑制脂肪细胞中的脂质累积,且 成脂标志基因 PPARγ、FABP4、C/EBPα 和 C/EBPβ 的表达水平显著下调(P<0.05)。综上表明,circCAP2 可能是黄牛前体脂肪细胞分化的正调控因子,可作为改善黄牛育种中脂肪沉积的新型标志物。本研究为深入探究 circCAP2 在黄牛脂肪沉积中的调控机制提供参考。

来源：2023年第7期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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