农业生物技术学报

作者：皇甫奕雯, 宋莉娜, 侯丽娥, 张扬, 陈国宏, 徐琪, 张钰

单位：扬州大学 动物科学与技术学院,扬州 225009

关键词：维生素 E,氧化应激,凋亡,鹅卵泡颗粒细胞,

基金：江苏现代农业产业技术体系建设专项资金(JATS[2020]435); 江苏省高等学校大学生创新创业训练计划项目(202111117115Y)

氧化应激介导的鹅(Anser cygnoides)卵泡颗粒细胞(granulosa cells, GCs)凋亡影响鹅产蛋性能。 本研究旨在探讨抗氧化剂维生素 E (vitamin E, VE)对鹅卵泡 GCs 凋亡的缓解作用。通过添加 H2O2 (100 μmol/L)建立鹅卵泡 GCs 氧化应激模型,并在体外检测氧化应激对鹅卵泡 GCs 凋亡的影响。在该模型中分别添加 4 种不同浓度的原花青素、白藜芦醇、没食子酸和VE,筛选出最佳缓解剂及最适浓度。进一步采用ELISA、qPCR 和免疫荧光检测等技术探讨最佳缓解剂 VE 对氧化应激介导的鹅卵泡 GCs 凋亡的作用。结果表明,100 μmol/L H2O2 处理 12 h 极显著促进鹅卵泡 GCs 凋亡(P<0.01) ;4 种不同抗氧化剂中,40 μmol/L VE 对氧化应激模型的缓解 作用最佳 (P<0.01),添加后可减少细胞乳酸脱氢酶 (lactate dehydrogenase, LDH)的释放量(P<0.05),降低氧化应激相关基因超氧化物歧化酶 1 (superoxide dismutase 1, SOD-1)、SOD-2、过氧化氢酶 (catalase, CAT) 表达量 、环氧化酶 2 (cyclooxygenase, COX-2)和活性氧 (reactive oxygen species, ROS)含量(P<0.05);细胞增殖活力显著上升(P<0.05)且呈剂量依赖性,抗凋亡基因B 细胞淋巴瘤/白血病-2 (B-cell lymphoma/leukemia-2, Bcl-2)的表达量显著上升(P<0.05),促凋亡基因半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3 (cysteinyl aspartate specific proteinase 3, Caspase3)、Caspase9 和肿瘤抑制基因肿瘤蛋白 p53 (tumor protein p53, p53)的表达量显著下降(P<0.05),细胞凋亡数显著降低(P<0.05)。本研究表明,在氧化应激诱导条件下,鹅卵泡 GCs 存在明显的凋亡,添加 VE 可抑制氧化应激缓解鹅卵泡GCs 凋亡,本研究可为提高鹅的产蛋性能提供参考。

来源：2023年第8期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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