农业生物技术学报

作者：李丁山, 韩星, 林文忠, 查晴辰, 张文文, 杜振国, 张洁, 吴祖建

单位：1 福建农林大学 植物病毒研究所/闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室,福州 350002; 2 江西省农业技术推广中心,南昌 330046

关键词：新竹番茄曲叶病毒(ToLCHsV),AV2蛋白,邻近依赖的生物素鉴定(BioID),本氏烟甲羟戊酸激酶a (NbMVKa),

基金：国家自然科学基金(31870150); 福建农林大学科技创新基金(CXZX2020017A); 福建农林大学优秀博士学位论文资助基金(324-1122yb073)

单组分双生病毒V2蛋白在病毒侵染过程中行使重要功能,而双组分双生病毒AV2蛋白功能的研究相对较少。为揭示双组分双生病毒新竹番茄曲叶病毒(Tomato leaf curl Hsinchu virus, ToLCHsV) AV2蛋白功能,本研究利用邻近依赖的生物素鉴定(proximity-dependent biotin identification, BioID)-质谱联用技术,在本氏烟(Nicotiana benthamiana)中初步筛选出与AV2邻近的多个寄主蛋白。利用酵母双杂交(yeast two hybrid, YTH)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation, BiFC)验证了本氏烟甲羟戊酸激酶a (N. benthamiana mevalonate kinase a, NbMVKa)和ToLCHsV-AV2存在互作。利用烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus, TRV)诱导的基因沉默技术,将ToLCHsV侵染性克隆接种NbMVKa沉默的本氏烟,接种10 d后,NbMVKa沉默的本氏烟症状不明显,而未沉默植株表现叶片卷曲,同时利用Southern blot分析发现,沉默植株的病毒DNA积累量相对减少;接种20 d后,NbMVKa沉默的本氏烟和未沉默植株症状基本一致。结果表明,NbMVKa可能通过与ToLCHsV-AV2互作而对病毒致病起正调控的作用。本研究结果为进一步阐明双组分双生病毒AV2蛋白功能提供理论依据。

来源：2023年第9期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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