农业生物技术学报

作者：姚玮玮, 罗军, 王馨培, 屈小鹏, 田慧彬, 牛慧敏

单位：西北农林科技大学 动物科技学院/陕西省农业分子生物学重点实验室,杨凌 712100

关键词：西农萨能奶山羊,溶血磷脂酸酰基转移酶4 (AGPAT4),脂代谢,山羊乳腺上皮细胞(GMECs),

基金：国家科技重大专项转基因新品种培育(2018ZX0800802B); 国家自然科学基金(31772575)

溶血磷脂酸酰基转移酶4 (1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase 4, AGPAT4)是1-酰基甘油-3-磷酸O酰基转移酶家族的成员,具有催化甘油三酯合成的作用。为了阐明AGPAT4在山羊(Capra hircus)乳腺上皮细胞(goat mammary epithelial cells, GMECs)中的基因序列、结构以及AGPAT4对GMECs脂肪酸合成代谢的影响。本研究以西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞为实验材料,通过RT-PCR克隆AGPAT4基因,应用在线网站进行生物信息学分析,干扰与过表达AGPAT4进行功能分析。结果表明,本研究成功克隆得到AGPAT4基因CDS区1 137 bp (sequence ID: XM_005684959.3),编码378个氨基酸,蛋白分子量为43 939.35 u,理论pI值为8.92,存在跨膜结构,无信号肽,为携带正电荷的不稳定蛋白;AGPAT4蛋白与AGPAT1、AGPAT2、脂蛋白3 (lipin3, LPIN3)、二酰基甘油激酶(diacylglycerol kinases, DGK)、磷脂酶D (phospholipase D, PLD)、胞苷二磷酸-二酰基甘油合成酶(cytidine diphosphate-diacylglycerol synthase, CDS)等蛋白存在互作关系;干扰AGPAT4显著下调乙酰辅酶A羧化酶(acetyl coa carboxylase, ACC)基因表达(P<0.05);过表达AGPAT4显著上调硬脂酰辅酶A去饱和酶1 (stearoyl-coenzyme A desaturase, SCD1)与ACC基因表达(P<0.05)并显著促进细胞内甘油三酯积累(P<0.05)。以上结果表明,AGPAT4基因在山羊乳腺上皮细胞中对脂合成具有正向调控作用。本研究为后续开展AGPAT4基因对羊奶乳脂代谢的调控机制研究提供了基础资料。

来源：2023年第9期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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