农业生物技术学报

作者：杨园园, 程岚, 许佳迪, 李燕燕, 邓兆龙, 郝浩浩, 王平平, 金维环, 郭红祥

单位：1 河南农业大学 生命科学学院,郑州 450002; 2 河南省烟草公司驻马店市公司,驻马店 463000; 3 中国烟草总公司陕西省公司,西安 710061

关键词：烟草,自然抗性相关巨噬细胞蛋白(NRAMP),基因表达,镉吸收,转基因,

基金：驻马店市烟草公司科技项目(2021411700200005)

自然抗性相关巨噬细胞蛋白(natural resistance associated macrophage proteins, NRAMPs)在金属跨膜转运中起重要作用。为了研究烟草(Nicotiana tobacum) NRAMP基因在重金属镉(Cd)吸收和转运中的作用,本研究从栽培烟草'K326'中克隆到1个NRAMP亚家族基因,命名为NtNRAMP2 (GenBank No. OP972862);对其进行生物信息学分析和亚细胞定位,并使用qPCR分析其组织表达特异性、外源Cd、脱落酸(abscisic acid, ABA)以及乙烯处理的表达情况。结果表明,NtNRAMP2基因CDS全长为1 629 bp,编码542个氨基酸,包含4个外显子和10个跨膜结构域。进化分析显示其与番茄(Lycopersicon esculentum)和马铃薯(Solanum tuberosum)亲缘关系最近,亚细胞定位于内质网和液泡中。qPCR结果显示,NtNRAMP2基因在烟草不同组织中均有表达,但在根中表达量最高。在不同浓度和时间镉胁迫诱导下,NtNRAMP2表达量都显著升高(P<0.05),外源ABA和乙烯都能诱导烟草根中NtNRAMP2基因表达。同时,构建NtNRAMP2过表达载体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefacien)介导转化烟草'K326'并获得18株NtNRAMP2过表达转基因烟株。本研究为进一步探讨NtNRAMP2基因功能提供了参考。

来源：2023年第10期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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