农业生物技术学报

作者：龙德智, 郝科兴, 陈慧慧, 胡广东, 王静

单位：石河子大学 动物科技学院,石河子 832000

关键词：N-myc下游调节基因1 (NDRG1),原代子宫内膜上皮细胞,绵羊,

基金：兵团重点领域科技攻关计划项目(2021AB014); 石河子大学创新发展专项(CXFZ202112)

子宫内膜上皮细胞作为子宫内重要的细胞之一,其生物功能的改变影响着雌性动物妊娠的发生。为了探究N-myc下游调节基因1 (N-myc downstream regulated gene 1, NDRG1)的过表达对绵羊(Ovis aries)原代子宫内膜上皮细胞的生物功能的影响,本研究纯化原代绵羊子宫内膜上皮细胞,用瞬时转染的方法将NDRG1过表达载体导入原代子宫内膜上皮细胞,qRT-PCR和Western blot检测瞬时细胞模型的构建;用qRT-PCR检测细胞周期蛋白D1基因(cyclin D1, CCND1)、CCNB1和CCNA1、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关基因的表达;CCK-8法检测细胞的增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力。结果表明,pcDNA3.1-NDRG1组NDRG1基因及其蛋白的表达量极显著增高(P<0.01);CCND1表达量极显著下降(P<0.01);E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达量极显著增高(P<0.01),波形蛋白基因(Vimentin)表达量极显著降低(P<0.01);CCK-8结果显示,pcDNA3.1-NDRG1组增殖能力被抑制;划痕实验结果显示,pcDNA3.1-NDRG1组抑制细胞迁移能力。综上表明,NDRG1的过表达抑制了细胞的增殖,阻断了细胞周期G1/S的转变,抑制了其迁移能力,提示这与EMT过程相关。本研究为促进绵羊早期妊娠成功提供研究材料。

来源：2023年第11期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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