农业生物技术学报

作者：江地科, 邬旭龙, 陈弟诗, 王印, 姚学萍, 罗燕, 杨泽晓, 张鹏飞

单位：1四川农业大学 动物医学院/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,成都 611130; 2成都农业科技职业学院,成都 611130; 3四川省动物疫病预防控制中心,成都 610041

关键词：非洲猪瘟病毒(ASFV),p72蛋白,原核表达,胶体金,

基金：四川省科技计划(2021YJ0270); 2020年成都市科技项目技术创新研发项目(2019-YF05-00119-SN); 成都农业科技职业学院2020年院级科研基金(20ZR101)

为建立一种能快速、高效、简便检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)抗体的方法,本研究采用原核表达系统表达ASFV衣壳蛋白(p72)作为捕捉抗原,以纯化的抗ASFV p72蛋白多克隆抗体和兔抗猪IgG分别包被于硝酸纤维素膜上,分别作为质控线(C线)和检测线(T线),优化反应条件,制备胶体金免疫层析试纸条(colloidal gold immunochromatographic test strip, ICTS),用于临床样品检测。结果表明,本研究成功构建pCold-TF-p72重组蛋白,经Western blot和琼脂扩散实验表明,制备的抗p72多克隆抗体具有良好的反应原性与免疫原性;制备的胶体金试纸条与针对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2, PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性;临床样品阳性检出率为55.17% (48/87),商品ELISA试剂盒阳性检出率为59.77% (52/87),两者阳性符合率为92.31% (48/52)。本研究制备的胶体金试纸条为临床ASFV抗体检测及疫病预防具有一定的参考意义。

来源：2022年第1期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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