农业生物技术学报

作者：覃慧娟, 范付华, 周紫晶

单位：1 贵州大学 贵州省森林资源与环境研究中心/贵州省高原山地林木培育重点实验室,贵阳 550025;2 贵州大学 林学院,贵阳 550025

关键词：马尾松,内参基因,激素处理,qPCR,

基金：贵州省科技计划项目(黔科合平台人才[2018]5261; 黔科合平台人才[2017]5788)

马尾松(Pinus massoniana)的利用价值极高,施加外源激素可促进其茎干的次生生长和木材形成,快速提高生长速度。筛选激素处理下马尾松茎干qPCR实验的最佳内参基因,可为马尾松次生生长的基因表达研究提供技术支持。本研究从马尾松茎干转录组数据库选取14个候选内参基因,利用qPCR技术进行基因表达分析,采用GeNorm、NormFinder和BestKeeper三款软件分析候选内参基因在不同激素—生长素(auxin, IAA)、赤霉素(gibberellin, GA3)和油菜素内酯(brassinolide, BR)处理条件下马尾松茎干中的表达稳定性,并借助目的基因—纤维素合成酶2 (cellulose synthase 2, CESA2)对筛选出的内参基因进行验证。结果显示,在不同激素处理下,表达稳定性最佳的内参基因为磷酸胆碱胞二苷酰基转移酶1基因(phosphoate cytidine transferase 1, PCYT1)、泛素结合酶E2D基因(ubiquitin-conjugating enzyme E2D, UBE2D)和磷酸葡萄糖变位酶基因(phosphoglucomutase, PGM);目的基因CESA2在激素处理下的表达模式证实上述内参基因组合具有良好的可靠性。本研究筛选的内参基因有助于提高马尾松qPCR实验的准确性和可靠性,为在激素处理下的马尾松基因表达分析提供技术支持。

来源：2022年第2期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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