农业生物技术学报

作者：季春辉, 郭蕴, 王立霞, 宁程程, 李娜, 乔军, 孟庆玲, 才学鹏

单位：1 石河子大学 动物科技学院,石河子 832003; 2 中国兽药监察所,北京 100081

关键词：单核细胞增生李斯特菌(LM),sRNA rli82,环境应激,生物被膜,

基金：国家重点研发计划子课题(2016YFD0500900); 国家自然科学基金(31360596; 30960274)

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)是一种对外界环境具有广泛适应性的人兽共 患革兰氏阳性菌。为了解 sRNA rli82 对 LM 环境应激及生物被膜(biofilm, BF)的调控作用。本研究以 LM EGD-e 基因组为模板,扩增 sRNA rli82,并利用生物信息学分析 rli82 的分子特征和可能调控的潜在靶 基因;通过同源重组技术构建 rli82 基因缺失株 LM-Δrli82 及回补株 LM-Δrli82/rli82,比较其在不同胁迫环境下的生长情况及 BF 形成能力的差异,并通过 qPCR 检测与环境应激和 BF 形成相关基因的转录水平。 结果显示,rli82 基因全长 70 bp,二级结构拥有 2 个大的茎环结构,其调控的潜在靶基因为肉碱转运结合 蛋白(carnitine transport binding protein, opuCC)。LM-Δrli82 与 LM EGD-e 和 LM-Δrli82/rli82 相比,在不同 渗透压(4% 和 8% NaCl)处理下,LM-Δrli82 环境适应能力显著增强,而在 3.8% 乙醇、pH4、pH9 以及 30 ℃ 的应激处理下环境适应能力显著降低。3 株菌的 BF 形成能力无明显差异。qPCR 显示与环境应激有关基 因相对表达量显著降低,表明 rli82 对 LM 的环境应激适应能力发挥了重要的调控作用,本研究为进一步揭示 sRNA rli82 调控 LM 环境应激能力的分子机制提供了参考。

来源：2022年第5期

《农业生物技术学报》期刊编辑部

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